瘢痕疙瘩发病风险与Fas基因-670位点多态性(2)
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参见附件(1693KB，3页)。
1.3 为检验反向点杂交结果的正确性，随机抽取18例PCR扩增产物送上海生工生物公司测序。
1.4 统计学处理：应用SPSS10.0统计软件包处理数据，采用χ2检验分析各组等位基因和基因型频率分布的差异，并计算表示相对风险度的比值比(odds ratio,OR)及其95%可信区间(confidenceinterval,CI)。
2结果
根据我们设计的方案，杂交结束后膜条上格显示蓝紫色斑点为A/A基因型，中格显示蓝紫色斑点为G/G基因型，而上、中全部显示为A/G基因型，下格为空白对照，无斑点显示(图1)。瘢痕疙瘩组和正常对照组Fas基因多态性比较如表1、2所示。
实验中，在瘢痕疙瘩和正常对照组间的年龄构成比例相似，对照组及瘢痕疙瘩患者组的Fas-670位点基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡的情况下，结果显示：①瘢痕疙瘩组的A等位基因频率(54.7%)明显高于正常对照组(43.8%)(χ2=4.408,P=0.036,P<0.05)；而瘢痕疙瘩患者的A/G、 G/G基因型频率分别为40.0%和25.3%， 与正常对照组相比差异无显著性 (χ2值分别为1.051和1.134； P值分别为0.305和0.287)；②瘢痕疙瘩组的A/A 基因型频率为34.7%，明显高于正常对照组(χ2=5.207,P=0.022,P<0.05)。与A/G、G/G基因型相比，A/A 基因型者患瘢痕疙瘩的相对风险性(OR)明显增高(OR=2.122,95%CI: 1.105～4.077)。我们随机抽取的18例PCR扩增产物测序结果与反向点杂交结果完全吻合(图2)，证明了聚合酶链反应-反向点杂交结果的正确性。
3讨论
近年来，遗传因素在许多疾病的发生中所起的重要作用备受重视，且已发现了多种易感基因的存在。Fas基因即是目前较为关注的与瘢痕疙瘩疾病相关的基因之一。人Fas基因组DNA位于染色体10q24上，是全长36Kb的单拷贝基因，由8个内含子及9个外显子组成 ......
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