IL-18在病理性瘢痕中的表达及其生物学意义(2)
1.3 免疫组织化学技术检测IL-18蛋白的表达：标本切取后，常规制备石蜡切片，干燥保存。按IL-18试剂盒(Santa Cruz, Europe)说明书进行免疫组织化学(SP法)检测。每批标本均用 PBS 代替一抗作为空白对照。IL-18 阳性表达定位于细胞膜和细胞浆，均呈棕黄色颗粒或团快样分布。每张染色切片由两人分别对实验结果进行双盲法评估。采用IPP7.0图像分析软件，每张染色切片自表皮层向真皮层按系统抽样法随机抽取5个高倍镜视野(×400)，测定每个视野下阳性反应的累积光密度和所有细胞总面积，以每例5个视野的平均光密度作为该例的测量值，平均光密度=阳性反应的累积光密度/细胞总面积。
1.4 统计学分析：采用SPSS15.0统计学软件分析实验数据，计量结果用均数±标准差(x±s)表示，三组间差异采用方差分析和q检验。
2结果
2.1 IL-18 mRNA在正常皮肤及病理性瘢痕中的表达：IL-18 mRNA扩增曲线呈典型的S型，熔解曲线为单峰，排除非特异性扩增及引物二聚体的出现。10例正常皮肤、12例增生性瘢痕和12例瘢痕疙瘩的实时荧光定量RT-PCR相对转录量检测结果分别为1.6513±0.2632、1.2931±0.1805、1.3058±0.2107。正常皮肤表达量均高于增生性瘢痕和12例瘢痕疙瘩 ......
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2结果
2.1 IL-18 mRNA在正常皮肤及病理性瘢痕中的表达：IL-18 mRNA扩增曲线呈典型的S型，熔解曲线为单峰，排除非特异性扩增及引物二聚体的出现。10例正常皮肤、12例增生性瘢痕和12例瘢痕疙瘩的实时荧光定量RT-PCR相对转录量检测结果分别为1.6513±0.2632、1.2931±0.1805、1.3058±0.2107。正常皮肤表达量均高于增生性瘢痕和12例瘢痕疙瘩 ......
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