甘升远，夏德林，肖 鸣，邵学垒，吴双江，张 磊

    复合成骨诱导剂对骨髓基质干细胞成骨分化的影响

    甘升远，夏德林，肖 鸣，邵学垒，吴双江，张 磊

    (西南医科大学附属口腔医院口腔颌面外科四川 泸州646000)

    目的：探讨复合成骨诱导剂对骨髓基质干细胞(Bone Marrow Stromal Stem Cells， BMSCs)成骨分化的影响。方法：选取2月龄SD雄性大鼠2只，处死后冲洗股骨，胫骨骨髓腔获得骨髓组织，采用贴壁培养法纯化大鼠BMSCs，并进行原代和传代培养。取第三代BMSCs，将细胞分A～G 7个组，A组为对照组：在不含任何诱导剂的培养基内培养；B组为常规诱导组：在仅含有诱导剂(10.0mmol/β-甘油酸钠，10-8mol/L地塞米松，50mg/L抗坏血酸)的培养基内培养；C，D，E，F，G组为复合诱导组，在含有复合诱导剂(常规诱导剂+阿仑膦酸钠)的培养基内培养，其中阿仑膦酸钠的浓度分别是10-6mol/L、10-7mol/L、10-8mol/L、10-9mol/L、10-10mol/L。观察细胞贴壁生长增殖及形态变化，western-blot法检测骨形态发生蛋白(BMP-2)的表达。结果：观察发现各组细胞贴壁生长良好，呈长梭形，细胞均存活，E组细胞体积变得肥大，长出多个胞浆突起呈多角形，细胞周围可见云雾状分泌物。A组中细胞呈长梭形增殖，形态未见明显变化，分泌物最少。各周各组western检测发现BMP-2表达量顺序均如下：10-8mol/L 组>10-7mol/L组>10-9mol/L组>10-6mol/L组>10-10mol/L组>常规诱导组>空白对照组。结论：阿仑膦酸钠在低浓度(10-8mol/L)时对骨髓基质干细胞成骨分化具有促进作用。

    阿仑膦酸钠；骨髓基质干细胞；大鼠；成骨分化；

    随着组织工程骨的发展为修复骨组织缺损提供了新方法，多因素诱导骨组织的发生，而基因强化的组织工程程序复杂，实施困难，因此需寻找复合成骨诱导剂诱导骨组织的发生。双膦酸盐可以降低骨组织吸收，形成并维持骨质的结构和矿化程度，调节骨更新[1]。阿仑膦酸钠属于第三代含氮二膦酸盐，是目前治疗骨质疏松症的常用药物之一，其主要机制是抑制破骨细胞的骨吸收功能[2]。骨髓基质干细胞是存在于骨髓基质中的一种非造血干细胞，易于扩增且具有多潜能分化能力。骨髓基质干细胞是最先且最早的骨组织工程种子细胞。骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins， BMP)是BMSCs分泌的糖蛋白，可以促进骨的生长。目前BMP蛋白种类较多 ......