PNL2在黑素瘤中的表达及意义(2)
1.2 试剂：S100单克隆抗体ab115968、HMB45单克隆抗体ab787、小鼠PNL2单克隆抗体ab12502(IgG1，上海市艾博抗贸易有限公司)；鼠兔通用型二抗，二氨基联苯胺(DAB) 显色剂均购自上海市艾博抗贸易有限公司。
1.3 方法：严格按照试剂盒说明书进行。免疫组织化学法：将10%福尔马林固定、石蜡包埋的黑素瘤组织制成4～5μm切片，常规烤片、脱蜡、水化；浸入0.01mol/L，pH值為6.0的枸橼酸盐缓冲液内，热抗原修复3min；在3%H2O2、室温下作用10min以消除内源性过氧化氢酶；滴加一抗(稀释度为1：800)；4℃过夜后在室温中复温20min；后滴加1mm EDTA缓冲液，滴加一抗(稀释度为1：10～1：25)，调pH值为9.0的稀释液中进行原位染色，热抗原修复3min；室温孵育30～60min；DAB显色1min左右；自来水冲洗，苏木精复染，通透、脱水，中性树胶封片，显微镜下观察结果。PBS代替一抗作为空白对照，已知PNL2、S100、HMB45染色阳性的黑素瘤切片作为阳性对照。
1.4 评价指标：所有切片在做免疫组化前均现切现用 ......
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1.3 方法：严格按照试剂盒说明书进行。免疫组织化学法：将10%福尔马林固定、石蜡包埋的黑素瘤组织制成4～5μm切片，常规烤片、脱蜡、水化；浸入0.01mol/L，pH值為6.0的枸橼酸盐缓冲液内，热抗原修复3min；在3%H2O2、室温下作用10min以消除内源性过氧化氢酶；滴加一抗(稀释度为1：800)；4℃过夜后在室温中复温20min；后滴加1mm EDTA缓冲液，滴加一抗(稀释度为1：10～1：25)，调pH值为9.0的稀释液中进行原位染色，热抗原修复3min；室温孵育30～60min；DAB显色1min左右；自来水冲洗，苏木精复染，通透、脱水，中性树胶封片，显微镜下观察结果。PBS代替一抗作为空白对照，已知PNL2、S100、HMB45染色阳性的黑素瘤切片作为阳性对照。
1.4 评价指标：所有切片在做免疫组化前均现切现用 ......
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