王 秀，张正文，谢 锋

    (河南省人民医院整形外科 河南 郑州 450000)

    自体软骨因取材丰富、组织相容性好、易于成活、与机体无排斥反应、感染及外露率低等优点被广泛应用于整形外科手术中，然而软骨移植术后，供区若遗留间隙或渗血可能会发生血肿、继发感染、局部皮肤坏死。鼻中隔术区可能出现黏骨膜坏死和穿孔，耳廓再造术中因切取肋软骨量较大，供区(尤其是儿童患者)术后可能会出现一定程度的胸廓畸形，并对正常胸廓形态发育产生一定影响。胸部术区软组织量多，一旦发生感染预后瘢痕明显或增生，外形异常甚至牵拉乳房移位变形等一系列并发症，致使患者及家属对手术效果不满意。供区软骨自身修复能力较差及创面恢复过程中的相应并发症一直是临床医师需要解决的难题。2001年法国科学家Choukroun[1]提取出第二代血小板浓缩制品富血小板纤维蛋白( platelet -rich fibrin，PRF)，取自自体，直接经离心所得，未添加任何生物制剂，被证明具有促进软组织的修复，减轻炎性反应和水肿，诱导干细胞的增殖、分化、运动、凋亡及促进骨组织修复重建的能力。近年来利用颗粒软骨单独或利用其他材料包裹移植进行各种软骨缺损的修复手术及鼻整形中的应用取得较好的手术效果[2-3]，为颗粒软骨的利用提供了依据。本基础实验观察PRF结合颗粒软骨修复兔耳软骨缺损的修复情况，为临床软骨移植术后供区修复提供参考。

    1 材料和方法

    1.1 实验动物：12～16周生长期雄性新西兰大白兔30只，体重3.2～3.5kg，均购自郑州大学医学院实验室，清洁级，普通环境下笼内单独饲养(均遵照河南省人民医院实验动物饲养与使用规定)。动物购置后适应环境2周。

    1.2 实验方法

    1.2.1 分组：将30只实验兔，随机分为5组，空白对照组、颗粒软骨组、PRF组、PRF+颗粒软骨组、软骨块回置组，每只实验兔双耳对称区各取一处作为实验区，每组12个标本。

    1.2.2 PRF制取：实验动物称重,7%的水合氯醛注射液按3ml/kg从耳缘静脉麻醉，麻醉成功耳中动脉抽血10ml置于5ml无菌玻璃试管，离心机3 000r/min离心10min，可见血液分为3层，上层清亮液为血清，底层为破碎红细胞层，中间乳白色为纤维蛋白凝胶层[4](图1)，取离心后试管中的中间层，保留少量底部红细胞层，放置于白色无菌纱布上，静置5min，称重，制备成100mg凝胶块(图2)，轻轻按压挤出剩余水分使之成膜状备用。

    1.2.3 制作软骨缺损动物模型及颗粒软骨的制取：于各组标记实验区切取面积约1.0cm×0.6cm的全层软骨组织 ......