高正君，谢沛霖，司小强，杨国虎，薛晓东，徐靖宏

    (1.甘肃省人民医院整形美容科 甘肃 兰州 730000；2.浙江大学附属第一医院整形美容科 浙江 杭州 310003)

    黑色素瘤(Melanoma，M)是起源于神经嵴的黑素细胞恶性肿瘤，恶性度极高。若早期发现可能通过手术治愈，但进展期和发生远处转移者5年生存率不足5%，平均生存期仅2～8个月[1]。美国国立卫生研究院(简称NIH)研究表明，黑色素瘤在世界各地的发病率迅速上升。据统计，黑色素瘤中，只有约13%～30%为色素痣来源，其余均为非色素痣来源[2]，而对黑色素瘤相关基因研究发现，BRAF基因是黑色素瘤中突变率最高的基因，是黑色素瘤特异性靶向治疗的热点基因，90%以上是BRAF V600E位点突变[3]，国内目前关于色素痣来源和非色素痣来源的黑色素瘤中BRAF V600E基因突变率的研究尚属空白。本研究通过对不同来源黑色素瘤中BRAF V600E基因突变进行检测，以探讨BRAF基因突变与不同来源黑色素瘤的临床表型关系。

    1 材料和方法

    1.1 材料：选取2010年1月1日-2016年12月31日于本院皮肤科和整形外科收治的84例黑色素瘤患者为研究对象，采集新鲜标本或病灶石蜡组织，所有标本均经病理HE染色和免疫组化诊断证实，见图1。所有患者均自愿参与本研究，并签署知情同意书。

    图1 黑色素瘤标本病理检测结果

    1.2 临床特征

    1.2.1 非色素痣来源：共62例标本，男35例，女27例；汉族57例，回族3例，藏族2例；发病年龄26～90岁，平均57.2岁；发病部位：肢端33例，非肢端24例，黏膜5例；淋巴结转移(-)36例，淋巴结转移(+)26例，其中远处转移6例。

    1.2.2 色素痣来源：共22例标本，男12例，女10例；汉族21例，回族1例，藏族0例；发病年龄29～88岁，平均57.5岁；先天性小痣9例，后天痣13例；发病部位：肢端12例，非肢端7例，黏膜3例；淋巴结转移(-)13例，淋巴结转移(+)9例，其中远处转移1例。

    1.3 BRAF V600基因突变检测方法

    1.3.1 肿瘤基因组DNA提取方法：新鲜样本使用Qiagen公司QIAamP DNA Mini试剂盒提取DNA ......