水动力辅助吸取成人脂肪来源干细胞的体外分离、培养和鉴定研究
传代,脂肪组织,1材料和方法,2结果,3讨论
陈 阳, 宋良萍,察鹏飞,彭 铮,何 宇(1.福州市皮肤病防治院整形美容外科 福建 福州 350025;2.福建国际旅行卫生保健中心 福建 福州 350001)
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是机体中一小部分具有扩增和多向分化能力的非造血基质细胞,属于成体干细胞的一种,可以通过诱导向特定的细胞系进行分化,并最终达到构建特定组织的目的,由于其体外高增殖率及多向分化潜能,已成为组织工程研究中种子细胞的重要来源[1-2]。虽然骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)早已成功获取,并曾成为干细胞的主要来源,但是抽取骨髓不仅会给供体造成痛苦,而且来源有限,且存在伦理问题,所以其广泛应用受到限制[3-4]。近年来学者们研究发现,脂肪组织中也含有大量具有自我更新能力和多向分化潜能的间充质干细胞,类似于骨髓间充质干细胞的特性,也称为脂肪来源干细胞(adipose tissue-derived stem cells,ADSCs),其来源充足,且体外培养扩增速度快,不必进行永生化就能获得足够的细胞,可充分满足临床治疗需要,被认为是一种理想的组织工程种子细胞来源,并已越来越多被应用于构建组织工程研究[5-7]。而水动力辅助吸脂具有取材简便、损伤小,抽吸后残留于供区的脂肪组织仍可扩增等优点,已广泛应用于美容外科吸脂手术[8]。然而,如何分离成人ADSCs并进行体外传代培养以及多系定向诱导分化已成为目前迫切需要解决的问题。为此,参考相关学者的研究方法,并进行综合和改进,以探索ADSCs的体外分离、培养与鉴定的便捷方法,以期为其能够作为组织工程理想的种子细胞及广泛应用于临床提供实验依据,现报道如下。
1 材料和方法
1.1 脂肪组织取材:选择成人脂肪丰厚的部位,如腹、腰、臀、股等部位(图1)。皮下浸润注射局部肿胀麻醉液麻醉(肿胀液:林格氏液1 000ml+2%盐酸利多卡因15ml+肾上腺素1mg+5%碳酸氢钠溶液12.5ml),于吸脂部位隐蔽处,采用11号刀片作3~5mm皮肤切口,选用直径3.8mm抽吸灌注探针,负压设置-0.5~-0.6bar,水流喷射强度2~3级,由深层向浅层呈扇形反复抽吸获取脂肪颗粒组织(图2)。

图1 腹部脂肪抽吸示意图 ......
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