影响脂肪组织工程中细胞外基质支架的相关因素研究进展(2)
特别是SDS已被证明可以与ECM形成强烈的相互作用,能够改变基质结构。在研究开始后,无论是SDS和脱氧胆酸钠造成不可逆的降解和形成的肿胀结构呈凝胶状物质。另外,SDS难以在处理结束后除去,并能显著地影响细胞活力。也有实验直接使用交联剂EX-810与蒸馏水和超声相配合对组织进行脱细胞处理并取得成功[10],说明交联剂也具有脱细胞的作用。由于化学脱细胞处理法时间相对较长,不可避免地会有微生物污染,因此,许多去细胞处理方案中也加入青霉素、链霉素等抗生素,或者也可采用电子束照射、γ射线等方法对所得组织进行灭菌处理[11]。1.3 生物法:主要为酶处理法。包括胰蛋白酶、脂肪酶、中性蛋白酶、核酸酶等。胰蛋白酶是脱细胞中常用的蛋白水解酶之一。一方面是因为它能够破坏组织的亚显微结构,可促进随后脱细胞试剂对组织的渗透,因此,常作为脱细胞程序中的第一步。另外,它是一种特异度比较高的蛋白水解酶,能特异性切断赖氨酸和精氨酸C端的多肽键(邻位不是脯氨酸情况下)。其最适温度为37℃,而对于相同的试剂,作用的时间、顺序和方法不同也会造成不同的结果。脱细胞方案中极小的差别也会大大影响脱细胞效果及所得组织性状,最适pH为8.0 ......
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