崔 超，张 珊，林 煌

    (1.北京怀柔医院急诊科 北京 100014；2.北京怀柔医院肿瘤科 北京 100014；3.首都医科大学附属北京安贞医院整形科 北京 100029)

    游离皮瓣越来越多地用于修复严重外伤和肿瘤术后的皮肤和软组织缺损。缺血再灌注损伤是不可避免的，会导致游离皮瓣显著组织损伤[1]。尽管皮肤缺血再灌注损伤的病因尚不清楚，但越来越多的证据表明微血管塌陷和血流缺陷是皮瓣缺血再灌注损伤的主要环节[2]。内皮细胞凋亡可能导致血管通透性、微血栓形成和组织炎症[3]。近年来，许多保护皮瓣的潜在方法和措施相继被挖掘出来，如高压氧、分子氢、缺血后处理等[4-5]，显示出良好的发展前景。几项研究表明，A型肉毒毒素(Botulinum toxin A，BTX-A)可以减轻动物模型上由缺血再灌注损伤引起的皮瓣坏死[6-7]。保护皮瓣的机制可能与增加血流量和血管舒张有关[8]。自噬是缺氧、低循环组织中细胞的一种保护作用，在维持细胞再灌注损伤等应激条件下的存活方面起着重要作用。研究证实，缺氧和复氧微环境导致血管内皮细胞损伤进而引起自噬基因表达增加[9]。本研究的主要目的是评估BTX-A对缺血再灌注损伤后大鼠皮瓣的保护作用是否与自噬有关。

    1 材料和方法

    1.1 实验动物：本研究经北京安贞医院伦理委员会批准。均采用成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠购自北京思贝福生物有限公司，体重300～350 g，在22℃～25℃标准条件下将大鼠圈养在12 h的明暗循环环境中。

    1.2 实验方法与分组：80只雄性SD大鼠随机分为四组：I/R组(n=20)：缺血8 h后血流再灌注，I/R前7 d注射生理盐水200 μl；BTX-A+I/R组(n=20)：缺血8 h后再灌注，I/R前7 d注射1 U BTX-A(Allergan，美国)，余操作同I/R组；BTX-A+I/R+3-MA(3-甲基腺嘌呤，自噬拮抗剂 ......