αSMA, Bcl-2, Ki67, CAM5/6在成釉细胞癌中的表达和意义(1)
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2010年1月1日
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【摘要】目的:本研究旨在探讨αSMA, Bcl-2, Ki67, CAM5/6在成釉细胞癌中的表达和意义;材料和方法:利用免疫组织化学方法研究αSMA, Bcl-2, Ki67, CAM5/6 四种因子在别在6例成秞细胞瘤和1例成釉细胞癌中的表达;结果:αSMA, Bcl-2, Ki67, CAM5/6在成釉细胞癌中的表达水平明显高于在成釉细胞瘤的表达。结论:我们推断αSMA, Bcl-2, Ki67, CAM5/6可望成有判断成釉细胞癌预后的指标。
【关键词】成釉细胞癌;αSMA;bcl-2;Ki67;CAM5/6
【中图分类号】R739.8 【文献标识码】A 【文章编号】1008-6455(2010)07-0111-03
Expression of αSMA, Bcl-2, Ki67, CAM5/6 in ameloblastic carcinoma
Zhao Wei Ye Mingfu Hu Yanping et al.
【Abstract】Objective:The present study aims to investigate the expression pattern and significance of αSMA, Bcl-2, Ki67, CAM5/6 in ameloblastic carcinoma. Methods:and Materials: 6 cases of ameloblastoma specimen and 1 cases of ameloblastic carcinoma specimen were collected from department of pathology, and αSMA, Bcl-2, Ki67, CAM5/6 expression pattern were evaluated by immunohistochemistry. Results: Comparing with ameloblastoma, αSMA, Bcl-2, Ki67, CAM5/6 expression level in ameloblastic carcinoma were significantly higher than in ameloblastoma. Conclusion:Our results indicate that αSMA, Bcl-2, Ki67, CAM5/6 may be a potential prognostic marker of ameloblastic carcinoma.
【Key words】Ameloblastic carcinoma;αSMA;Bcl-2;Ki67;CAM5/6
根据2005年WHO的头颈部肿瘤分类标准,成釉细胞癌(Ameloblastic Carcinoma)是一种极为罕见的牙源性恶性肿瘤,无论它是否出现转移,但均有成秞细胞瘤的组织学特征并伴有细胞异形性。成釉细胞癌是一种预后差的侵袭性肿瘤[1]。它可见于不同的年龄层,主要发生于30多岁的患者,80%发生于下颌骨[1]。病人的主要症状有疼痛,快速生长的肿块。区域性和远处转移,尤其是肺转移是该肿瘤的特征。手术切除后复发也很常见。除了更具有侵袭性外,成釉细胞癌较成釉细胞瘤在临床上和影像学上均无明显的特征性。因此,有必要从分子学水平来区分这两种截然不同的肿瘤。本研究通过免疫组织化学方法检测αSMA, Bcl-2, Ki67, CAM5/6在成釉细胞癌和成釉细胞瘤中的表达差异性, 为明确诊断和临床治疗成釉细胞癌提供新的思路。
1 材料与方法
1.1 材料:收集厦门市口腔医院病理科2005年到2010年确诊的成釉细胞癌病例1例和成釉细胞瘤6例,每例标本切4张白片。
1.2 试剂:αSMA 鼠抗人单克隆抗体(MAB-0003);Bcl-2 鼠抗人单克隆抗体(MAB-0014);Ki67 鼠抗人单克隆抗体(MAB-0129);CAM5/6鼠抗人单克隆抗体(MAB-0270);抗体稀释浓度为1∶100;Maxvision免疫组化试剂盒(KIT-5010);DAB 显色试剂盒(DAB-0031)。以上试剂购自福州迈新生物技术开发有限公司。
1.3 方法:全部标本采用MaxVision(KIT-5020 MaxVisionTM HRP-Polymer anti- Mouse/Rabbit IHC Kit)免疫组化法, 染色程序按MaxVision试剂盒说明书进行。简要概括如下:石蜡切片脱蜡和水化后,自来水冲洗;所有标本均采用微波抗原修复法;PBS冲洗三次,每次3-5分钟。除去PBS液,每张切片加1滴或50μl3%过氧化氢,室温下孵育10分钟,以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗三次,每次3分钟,除去PBS液;每张切片加1滴或50μl非免疫山羊血清,室温下孵育10分钟,直接甩去;每张切片加50μl的第一抗体,室温下孵育60分钟;PBS冲洗三次,每次3-5分钟。除去PBS液,每张切片加50μl 即用型MaxVisionTM 试剂,室温下孵育15分钟。PBS冲洗三次,每次3分钟;除去PBS液,每张切片加100μl新鲜配制的DAB显色液,作用3-5分钟,显微镜下观察;自来水冲洗,苏木素复染,PBS或自来水冲洗返蓝,梯度酒精脱水后,用二甲苯透明,再用中性树胶封固。
1.4 结果判定:αSMA, Bcl-2, CAM5/6三者均为胞质着色, Ki67为胞核染色,阳性信号为棕褐色, 以细胞胞浆出现褐色颗粒为阳性反应, 阴性对照组除细胞核染成蓝色外,应无褐色反应物 ......
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