三七对酒精性脂肪肝大鼠肝组织环氧合酶－2表达的影响(1)
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蔡丹莉 陈芝芸 严茂祥 何蓓晖 项柏康
摘 要：目的：观察三七对酒精性脂肪肝大鼠肝组织环氧合酶-2(COX-2)的表达。方法：62只SD大鼠随机分为正常组、模型组、三七大剂量组、三七小剂量组和易善复组。后4组以50%酒精灌胃和白由饮用10%酒精饮料进行酒精性脂肪肝的造模，易善复组、三七大、小剂量组大鼠在造模的同时予相应的药物进行干预，连续14周后HE染色观察肝组织病理学改变、免疫组化法测定肝组织中COX-2的表达、放免法检_测血浆血栓素B2(TXB，)和6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)的含量。结果：模型组大鼠肝组织出现不同程度的脂肪变，肝组织COX-2表达较正常组明显增强，血浆TXB1α、6-Keto-PGF1α含量及TXB2/6-Keto—PGF1α值较正常组明显升高。经大、小剂量三七干预后大鼠肝组织脂肪变程度较模型组明显减轻，COX-2表达明显减少·血浆TXB2、6-Keto-PGF1α含量及TXB2/6-Keto-PGF1α值也明显降低。结论：三七能明显改善酒精性脂肪肝大鼠微循环，抑制酒精性脂肪肝大鼠肝组织COX-2表达，这可能是其抗酒精性脂肪肝的作用机制之一。
关键词：酒精性脂肪肝；三七；环氧合酶-2；大鼠
中图分类号：1t285.5 文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2007)07-1391-03
近年来酒精性肝病在我国的发病迅速增加，成为危害国民健康的又一重大疾病。酒精性脂肪肝发生在乙醇对肝脏损伤的初期，在酒精性肝病中最为常见，部分病例将发展为酒精性肝炎、肝纤维化，最终导致肝硬化，因此加强对其的研究已成为十分迫切的现实。以往的研究发现，中药三七及其提取物具有护肝、抗氧化、抗纤维化等作用。本研究采用50%的酒精建立脂肪肝大鼠模型，观察三七对酒精性脂肪肝大鼠肝组织环氧合酶-2(COX-2)表达的影响，探讨其作用机理。
1 材料与方法
1.1 实验材料，SD大鼠62只，雄性，SPF级，体重(200±20)g，由中国科学院上海实验动物中心提供。乙醇：分析纯，纯度>99.7%，安徽特酒总厂生产。三七Panax notogin-seng(Burk.)F.H.Chen的产地浙江省，制成粉剂用时以蒸馏水配成混悬液。易善复胶囊：A.Nattermam&lie GMBH产品。血栓素B2(thromboxane B2，TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-prostaglandinF1α，6-Keto-PGF1α)放免试剂盒为解放军总医院科技开发中心放免所产品，批号均为20040128；COX-2多克隆抗体(工作浓度1：100)，美国Neomarkes公司产品，批号9121S4059；二步法免疫组化试剂盒PowerVisionTM-PV6001，北京中山生物技术有限公司，批号113212。
1.2 实验方法酒精性脂肪肝模型的建立：大鼠以50%(V/V)酒精10mL/Kg体重灌胃，2次/天(定时在8：00及20：00)，同时自由饮用10%(V/V)酒精饮料，并以普通大鼠饲料喂养连续14周建立酒精性脂肪肝模型。
分组及给药：购进的大鼠正常喂养1周后随机分为5组，正常组10只，不造模，以蒸馏水10mL/kg灌胃代替50%酒精和药物，自由饮用蒸馏水；模型组13只，在造模同时，再灌服蒸馏水10mL/(kg体重·天)；三七大剂量组和三七小剂量组各13只，在造模同时，分别灌服1.2g生药/(kg体重·天)和O.6g生药/(kg体重·天)的三七混悬液；易善复组13只，在造模同时，灌服91.2mg/(kg体重·天)的易善复混悬液，灌药时间固定在每天中午12：00，连续14周。
检测指标：14周未，大鼠禁食不禁水16h，以20%乌拉坦5mL/kg体重腹腔注射麻醉，腹腔静脉取血，分离血浆，放免法测定血浆中TXB2、6-Keto-PGF1α的含量。迅速取肝右叶组织，4%多聚甲醛固定，HE染色光镜观察肝组织脂肪变性的程度，酒精性脂肪肝病理组织学诊断参考中华医学会肝脏病学分会2002年南京会议制定的“酒精性肝病诊断标准。肝脂肪变程度判断标准：无肝细胞脂肪变为(一)，肝小叶内
2.3 大鼠肝组织COX-2的表达COX-2的阳性表达主要在肝细胞膜以及枯否细胞的胞浆和胞膜中。正常组大鼠肝组织中无COX-2阳性表达。模型组大鼠肝组织中COX-2的表达较正常组明显增强(P<0.01)；三七大、小剂量组大鼠肝组织中COX-2表达均较模型组显著降低(P<0.01)；易善复组大鼠肝组织中COX-2表达与模型组比差异无显著性(P>0.05)。见表2
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