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编号:11531738
复方心康宁胶囊中野黄芩苷的含量测定
http://www.100md.com 2007年12月1日 《中华中医药学刊》 2007年第12期
复方心康宁胶囊中野黄芩苷的含量测定
复方心康宁胶囊中野黄芩苷的含量测定

     摘要:目的:建立测定复方心康宁胶囊中野黄芩苷含量的方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱条件:4.6mm×250mm不镑钢柱,填料为十八烷基硅烷键合硅胶(5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸(25:75);检测波长为335nm;流速为1mL/min;柱温35%。结果:野黄芩苷在进样量为0.171~0.685μg,呈良好的线性关系。回归方程为Y=689.87X-3.4049,相关系数r=0.9998,相对回收率为98.7%,相对标准偏差RSD=1.292%。结论:本方法简便,重现性好,精密度高,测定结果准可靠,具有可行性,可作为该制剂质量控制方法。

    关键词:复方心康宁胶囊;野黄芩苷;高效液相色谱法

    中图分类号:R284

    文献标识码:A 文章编号:1673-7717(2007)12-2642-02

    复方心康宁胶囊是正在研制开发的复方中药制剂,临床上主要是用于治疗冠心病、心绞痛、脑血栓、脑梗塞所致的瘫痪等疾病。方中灯盏细辛具有活血化瘀、解表止痛、消积解毒等功效,故灯盏细辛为方中君药。灯盏细辛产于云南、广西等地,为菊科植物短葶飞蓬Erigeron breviscapus(Vant.)Hand.-Mazz.的干燥全草。灯盏细辛中主要成分野黄芩苷(Seutellarin,化学结构为4,5,6-三羟基黄酮-7-O-葡萄糖醛酸苷)是黄酮类成分,药理实验表明具有降低血管阻力,增加脑血流量,改善心肌供血,增加心收缩力,改善微循环,扩张血管及微细动脉,降低血黏度,减低纤维蛋白原,增进冠脉血液量,改善缺血、缺氧作用。 灯盏细辛中野黄芩苷为活性成分,本试验采用高效液相法对灯盏细辛中野黄芩苷进行含量测定,并进行了方法学考察,结果表明该方法能够准确、快速地测定野黄芩苷的含量,达到控制药品质量的目的。
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    1.仪器与实验材料

    1.1仪器 LC-10AVP高效液相色谱仪(岛津);10680泵;CLASS-VP5.02色谱工作站;SPD-10AVP检测器。

    1.2材料 药品:复方心康宁胶囊,自制,200mg/粒。药材:灯盏细辛,产地:云南。试剂:乙腈(色谱纯),磷酸(分析纯),甲醇(色谱纯),纯净水。对照品:野黄芩苷对照品购自中国生物制品检定所。含量:98.O%以上。

    2.方法与结果

    2.1色谱条件 色谱柱:4.6×250mm不锈钢柱,填料为十八烷基硅烷键合硅胶(5μm)。流动相:乙腈-0.1%磷酸(25:75)。流速:1mL/min。进样量:10μL。检测波长:335nm。柱温:35℃。

    2.2对照品与供试品溶液的制备 对照品溶液:精密称取干燥至恒重的野黄芩苷对照品8.58mg,置100mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取4mL,置10mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液(0.034mg/mL)。见图1。
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    供试品溶液:取本品装量差异检查项下的胶囊内容物约200mg,精密称定,置100mL容量瓶中,加甲醇适量,超声处理30min,放冷后加甲醇至刻度,摇匀,精密吸取5mL,置10mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。见图2。

    阴性溶液:按处方制备灯盏细辛缺味制剂,照供试品溶液项下处理,作为阴性对照溶液,阴性无干扰。

    2.3线性关系 精密称取野黄芩苷对照品8.58mg,置100mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,分别量取2、3、4、5、6、7、8mL,置10mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,配成不同浓度的对照品溶液。

    分别量取上述溶液各10μL,注入液相色谱仪,测出峰面积。以进样量为横坐标,峰面积为纵坐标作图,绘制标准曲线,回归方程为Y=689.87X-3.4049,相关系数r=0.9998。表明野黄芩苷在进样量为0.171~0.685μg,呈良好的线性关系。
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    2.4精密度试验 取050910批胶囊内容物约200mg,精密称定,按供试品制备方法制备。重复进样5次,测定峰面积,计算RSD=1.021%。结果显示精密度良好。

    2.5稳定性试验 取050910批样品,按供试品溶液制备方法制备,分别在配制后0、2、4、6、8、10h进样,计算RSD=1.028%,结果表明样品在10h内稳定。

    2.6重现性试验 精密称取050910批样品5份,按供试品溶液制备方法制备,进行测定,计算RSD=1.107%。结果表明重现性良好。

    2.7 回收率试验 取050910批样品5份,每份称取100mg,精密称定,分别置100mL容量瓶中,分别加入适量对照品,按供试品溶液制备方法制备,各取10μL进样,测得平均回收率为98.7%,RSD=1.292%。结果显示回收率符合要求。

    2.8样品含量测定 供试品溶液的制备,取供试品胶囊10粒,倾出内容物,混匀。称取200mg,精密称定,按供试品溶液制备方法制备。取供试品溶液10μL注入液相色谱仪,记录峰面积,计算含量。结果见表1。
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    3.讨论

    3.1流动相的选择 根据文献报道,野黄芩苷的含量测定多采用甲醇一水系统作为流动相,但在实际操作中,主峰与杂质峰不能完全分离,因此改用乙腈-水系统,即可达到峰的分离,野黄芩苷与杂质峰的分离度大于1.5,但峰形欠佳,出现拖尾,故加入磷酸矫正,最终确定用乙腈-0.1%磷酸作为流动相。

    3.2样品提取方法的选择 根据野黄芩苷的性质,选择甲醇作为提取溶剂。曾经参照药典中测定药材中野黄芩苷的方法,采用索氏提取器提取,先加三氯甲烷回流提取,除去部分脂溶性成分,再用甲醇回流提取,此方法操作繁琐,耗时长,后经研究发现,采用甲醇超声提取的效果较好,操作简单,提取充分,测定结果准确、可靠,故采用此法。

    3.3结论 本试验建立的复方心康宁胶囊中野黄芩苷含量的测定方法,重现性较好,分离度好,精密度高,测定结果准确可靠,具有可行性,可作为该制剂质量控制方法。, http://www.100md.com(陈志娟 张 坚 赵 阳 王丽峰)