实验性自身免疫性重症肌无力动物模型的建立(2)
2.2AChR数目的计算将正常小鼠和EAMG小鼠后肢肌肉溶于1%(体积分数)TritonX-100中，分别加入过量125I标记过的α-银环蛇毒(α2But x)的磷酸盐缓冲液，孵育1～3h后加入过量兔抗鼠IgG进行免疫沉淀反应，所得沉淀物用磷酸盐缓冲液冲洗2遍后用γ-计数仪计数，并用标准曲线求取已结合抗体的AchR数。EAMG模型的AChR数目应较正常鼠明显减少[16]。2.3肌电图动物麻醉后固定于解剖板上，将成对刺激电极以2～3mm距离插至坐骨切迹附近肌肉内，记录电极置于腓肠肌内侧头(跟腱附着处)。重复用50～100Hz电刺激时EAMG模型的腓肠肌电位及收缩波幅呈衰减反应[17]。
2.4光镜观察实验动物断颈处死，迅速取其腓肠肌，以40g/L多聚甲醛固定，常规制作石蜡切片。然后用011moL/Lα2Butx标记辣根过氧化酶(α2Butx2HRP)孵育切片1h，用PBS洗3次，最后用联苯二胺双氧水(DAB2H2O2)于室温下显色 ......
您现在查看是摘要页，全文长 4220 字符。