山茱萸多糖炮制前后的化学研究(2)
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2.2山茱萸多糖的纯化
称取DEAE-52纤维素100g，以400mL蒸馏水充分溶胀24h，减压抽干，水洗至中性，减压抽干，以1mol•L-1NaOH溶液浸泡1h，水洗至中性，以1mol•L-1HCl溶液浸泡1h后，水洗至中性，1mol•L-1 NaOH溶液浸泡1h后，水洗至中性，湿法装柱两根；将山茱萸生、制品40%粗多糖进行DEAE-52柱层析，分别以H2O、0.1～2.0mol•L-1 NaCl洗脱，每10mL收集1管，苯酚硫酸法跟踪检测，绘制洗脱曲线(见图1)，根据洗脱曲线合并单一峰，洗脱液减压浓缩，对水透析，冷冻干燥得山茱萸生、制品不同浓度NaCl洗脱的粗多糖。
经巨噬细胞体外实验表明，0.1mol•L-1和0.3mol•L-1NaCl洗脱的粗多糖均有增强巨噬细胞吞噬功能的作用，但0.1mol•L-1NaCl洗脱的生、制品粗多糖之间有显著性差异，而其他部分差异不大，故对0.1mol•L-1洗脱的部分进行进一步分离纯化。
取Sephadex G-200葡聚糖凝胶用适量蒸馏水浸泡12h,再以100℃溶胀4h后,抽气装柱,用0.1mol•L-1NaCl溶液平衡48h ......
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