运脾温阳方及拆方对正常和脾虚小鼠脾细胞增殖的影响(2)
2.1.2 脾细胞的接种与培养
取96孔培养板每孔加50μL浓度为6×107/mL脾细胞悬液;ConA(使终浓度为5ug/mL)或LPS(使终浓度为10ug/mL)各50μL,然后加入运脾温阳方、运脾方、温阳方、健脾方各药5个浓度(终浓度分别为10、5、2.5、1.25、0.625mg/mL)。设加刺激物组和脾细胞组作对照,每个浓度8个复孔。置37℃,5%CO2培养箱中培养72h。
2.1.3 MTT法检测脾细胞增殖
取培养72h的脾细胞,每孔加入20μLMTT,继续孵育4h,3500r/min离心10min,用1mL注射器小心吸弃上清后加入DMSO150μL,在酶标仪上振荡60s,于λ=540nm处测OD值。
2.2 运脾温阳方及其拆方对脾虚小鼠脾细胞增殖的影响
取ICR小鼠24只,体重20~22g,灌胃15%大黄水煎液0.6mL/只,每天1次,连续12天造成脾虚模型备用。随机取ICR脾虚小鼠4只,摘眼球放血处死小鼠。脾细胞悬液的制备、接种与培养,MTT法检测脾细胞增殖同2.1。
3 结 果
运脾温阳方及拆方对正常小鼠和脾虚小鼠脾细胞增殖结果见表1~4 ......
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