养心通脉有效部位方促血管生成作用的实验研究(1)
摘 要:目的;探讨养心通脉有效成分部位方(YTⅡ)促进血管新生,治疗心肌缺血的机理。方法:运用血清药理学的方法制备含药血清,鸡胚随机分为养心通脉方(YTⅠ)组、养心通脉有效部位方(YTⅡ)组、bFGF组和空白血清(KX)组;72h后观察比较YTⅡ及各含药血清对各组CAM模型鸡胚存活情况、CAM标本形态、CAM血管数量的影响。结果:加药72h后,各药物组与空白血清组比较皆有统计学意义(均P<0.01),各组血管新生数呈bFGF组>YTⅡ组>YTⅠ组>KX组趋势。结论:YTⅡ与YTⅠ、bFGF一样有促血管新生作用,且YTⅡ作用与bFGF作用相当,明显优于YTⅠ。
关键词:养心通脉有效部位方(YTⅡ);血管生成 ; 鸡胚绒毛尿囊膜
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1673-7717(2010)01-0054-03
Positive Research on the Effective Components
, http://www.100md.com
Recipe of YangXinTongMai Formula(YT II) on the Angiogenesis
MO Li,YUAN Zhaokai , HUANG Xianping , CHEN Qinghua , JIAN Weixiong,HU Zhixi,SUN Guixiang
(Hunan University of TCM, Changsha 410007,Hunan, China)
Abstract:Objective: To investigate the mechanism of the effective components recipe of YangXinTongMai Formula on the angiogenesis and improving myocardial ischemia. Methods:The chorioallantoic membrane(CAM) model was cultured and devided into YangXinTongMai Formula(YT I )group and controlled group including the effective components recipe of YangXinTongMai Formula(YT II) group, bFGF group and KX group.the survival rate,growth shape and vessel counts of CAM model in every group was observed after 72 hours. Results:The vessel counts in bFGF group,YT-II group and YT-I group is more than KX group (P<0.01), in the trend of bFGF group>YT-II group>YT-I group>KXgroup. Conclusion: Our study indicated that YT-II can improving angiogenesis as well as YT-I and bFGF,and more better than YT-I to some extent.
, http://www.100md.com
Key words:the effective components recipe of YangXinTongMai Formula(YT II) ; angiogenesis; chorioallantoic membrane
冠心病是冠状动脉狭窄或闭塞导致心肌缺血,从而影响心功能的临床常见心血管疾病。近年来冠状动脉旁路移植术、经皮冠脉内血管成形术等新技术的开展取得了一定疗效,但仍有相当部分病人药物治疗效果不佳且并不适宜血管重建术,因此通过治疗性血管增生以减轻心肌缺血逐渐成为目前研究的热点。养心通脉方(YTⅠ)是根据秦伯未先生“扶养心气,和通血脉”之法制定的治疗胸痹心痛的有效名方,由人参、丹参、枳实、泽泻、桂枝等按一定比例组成,对缺血性心脏病、高脂血症、动脉粥样硬化等均具有显著的临床疗效[1-2]。养心通脉有效部位方(YTⅡ)是笔者从YTⅠ原方综合提取出的人参皂苷等10个成分部位中,通过前期系列实验所确定的“最佳有效成分部位方”。本项研究主要通过观察药物作用72h后,鸡胚绒毛尿囊膜模型(chorioallantoic membrane,CAM)的血管形态学和新生血管计数的变化,以探讨养心通脉有效成分部位方(YTⅡ)促进血管新生,治疗心肌缺血的机理。
, http://www.100md.com
1材料与方法
1.1实验材料
1.1.1 实验动物 清洁级健康雄性SD大鼠,体重(200±20)g,由中南大学实验动物学部提供,合格证号SCXK(湘)2006-0002;实验环境设施合格证号:医动字第20-001号。
1.1.2 实验种蛋 鸡受精3日卵45个,50～65g/蛋,均为白皮种,表面清洁,蛋形规范,气室、气孔均匀,由湖南亚华种业有限公司提供。
1.1.3 实验药品
(1)养心通脉方原方(YTⅠ):由人参、丹参、枳实、泽泻、桂枝等按一定比例组成,药材购自湖南省药材公司,品种均经湖南中医药大学中药制剂专家鉴定认可。由湖南省中医药研究院中药研究所制剂室生产成片剂(批号20051106),每片含生药2g,用时以蒸馏水稀释成所需浓度。
, http://www.100md.com
(2)养心通脉有效部位方(YTⅡ):是由养心通脉方原方中综合提取的人参皂苷、丹参酮ⅡA、人参多糖、总生物碱、总挥发油等有效成分部位配伍制成口服液。由中南大学湘雅医学院药化系提取,使用时蒸馏水稀释成所需浓度。
(3)外用重组牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF):由珠海亿胜生物制药有限公司生产(商品名“贝复济”),规格:63000IU/瓶,批号:国药准字S10980077。用时以蒸馏水稀释成所需浓度。
1.1.4 实验试剂 (1)生理盐水,碘酊,1‰新洁尔灭,75%酒精,甲醇,丙酮等分析纯或化学纯试剂均为国产分析纯。②混合纤维素酯微孔滤膜,孔径0.45μm,上海兴亚净化材料厂生产,丽欣生物工程有限公司提供。③ф25mm针式滤器,规格0.22μm/个,法国Millipore公司产品。
1.1.5 实验仪器 AB104-N精密电子天平;GSY型恒温水浴锅;TH2-98A电热恒温培养箱;SW-CJ-IF型超净工作台;MLS-3020高压蒸汽消毒锅;V-CP470/CH彩色闭路监控摄像机;微量可调移液器;S2-93自动双重纯水蒸馏器;MIAS医学图象分析系统;SZX-ILLD200解剖显微镜。
1.2实验方法
1.2.1 含药血清的制备 (1)动物灌药:取20只上述SD健康雄性大鼠,按体重分层,随机分为4组,每组5只。a.养心通脉有效部位方组(YTⅡ组):YTⅡ灌胃(按人参皂苷34.33g、丹参酮ⅡA1.27g、人参多糖4.77g、总生物碱0.67g、总挥发油62.2mL生药/kg体重的剂量配伍);b.养心通脉方原方组(YTⅠ组): YTⅠ灌胃,剂量3.125g/(kg•d);c.无药血清组(KX组):等体积蒸馏水灌胃。各组每只大鼠每次灌胃4mL,每日1次,连续5天。, 百拇医药(莫 莉 袁肇凯 黄献平 陈清华 简维雄 胡志希 孙贵香)
关键词:养心通脉有效部位方(YTⅡ);血管生成 ; 鸡胚绒毛尿囊膜
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1673-7717(2010)01-0054-03
Positive Research on the Effective Components
, http://www.100md.com
Recipe of YangXinTongMai Formula(YT II) on the Angiogenesis
MO Li,YUAN Zhaokai , HUANG Xianping , CHEN Qinghua , JIAN Weixiong,HU Zhixi,SUN Guixiang
(Hunan University of TCM, Changsha 410007,Hunan, China)
Abstract:Objective: To investigate the mechanism of the effective components recipe of YangXinTongMai Formula on the angiogenesis and improving myocardial ischemia. Methods:The chorioallantoic membrane(CAM) model was cultured and devided into YangXinTongMai Formula(YT I )group and controlled group including the effective components recipe of YangXinTongMai Formula(YT II) group, bFGF group and KX group.the survival rate,growth shape and vessel counts of CAM model in every group was observed after 72 hours. Results:The vessel counts in bFGF group,YT-II group and YT-I group is more than KX group (P<0.01), in the trend of bFGF group>YT-II group>YT-I group>KXgroup. Conclusion: Our study indicated that YT-II can improving angiogenesis as well as YT-I and bFGF,and more better than YT-I to some extent.
, http://www.100md.com
Key words:the effective components recipe of YangXinTongMai Formula(YT II) ; angiogenesis; chorioallantoic membrane
冠心病是冠状动脉狭窄或闭塞导致心肌缺血,从而影响心功能的临床常见心血管疾病。近年来冠状动脉旁路移植术、经皮冠脉内血管成形术等新技术的开展取得了一定疗效,但仍有相当部分病人药物治疗效果不佳且并不适宜血管重建术,因此通过治疗性血管增生以减轻心肌缺血逐渐成为目前研究的热点。养心通脉方(YTⅠ)是根据秦伯未先生“扶养心气,和通血脉”之法制定的治疗胸痹心痛的有效名方,由人参、丹参、枳实、泽泻、桂枝等按一定比例组成,对缺血性心脏病、高脂血症、动脉粥样硬化等均具有显著的临床疗效[1-2]。养心通脉有效部位方(YTⅡ)是笔者从YTⅠ原方综合提取出的人参皂苷等10个成分部位中,通过前期系列实验所确定的“最佳有效成分部位方”。本项研究主要通过观察药物作用72h后,鸡胚绒毛尿囊膜模型(chorioallantoic membrane,CAM)的血管形态学和新生血管计数的变化,以探讨养心通脉有效成分部位方(YTⅡ)促进血管新生,治疗心肌缺血的机理。
, http://www.100md.com
1材料与方法
1.1实验材料
1.1.1 实验动物 清洁级健康雄性SD大鼠,体重(200±20)g,由中南大学实验动物学部提供,合格证号SCXK(湘)2006-0002;实验环境设施合格证号:医动字第20-001号。
1.1.2 实验种蛋 鸡受精3日卵45个,50～65g/蛋,均为白皮种,表面清洁,蛋形规范,气室、气孔均匀,由湖南亚华种业有限公司提供。
1.1.3 实验药品
(1)养心通脉方原方(YTⅠ):由人参、丹参、枳实、泽泻、桂枝等按一定比例组成,药材购自湖南省药材公司,品种均经湖南中医药大学中药制剂专家鉴定认可。由湖南省中医药研究院中药研究所制剂室生产成片剂(批号20051106),每片含生药2g,用时以蒸馏水稀释成所需浓度。
, http://www.100md.com
(2)养心通脉有效部位方(YTⅡ):是由养心通脉方原方中综合提取的人参皂苷、丹参酮ⅡA、人参多糖、总生物碱、总挥发油等有效成分部位配伍制成口服液。由中南大学湘雅医学院药化系提取,使用时蒸馏水稀释成所需浓度。
(3)外用重组牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF):由珠海亿胜生物制药有限公司生产(商品名“贝复济”),规格:63000IU/瓶,批号:国药准字S10980077。用时以蒸馏水稀释成所需浓度。
1.1.4 实验试剂 (1)生理盐水,碘酊,1‰新洁尔灭,75%酒精,甲醇,丙酮等分析纯或化学纯试剂均为国产分析纯。②混合纤维素酯微孔滤膜,孔径0.45μm,上海兴亚净化材料厂生产,丽欣生物工程有限公司提供。③ф25mm针式滤器,规格0.22μm/个,法国Millipore公司产品。
1.1.5 实验仪器 AB104-N精密电子天平;GSY型恒温水浴锅;TH2-98A电热恒温培养箱;SW-CJ-IF型超净工作台;MLS-3020高压蒸汽消毒锅;V-CP470/CH彩色闭路监控摄像机;微量可调移液器;S2-93自动双重纯水蒸馏器;MIAS医学图象分析系统;SZX-ILLD200解剖显微镜。
1.2实验方法
1.2.1 含药血清的制备 (1)动物灌药:取20只上述SD健康雄性大鼠,按体重分层,随机分为4组,每组5只。a.养心通脉有效部位方组(YTⅡ组):YTⅡ灌胃(按人参皂苷34.33g、丹参酮ⅡA1.27g、人参多糖4.77g、总生物碱0.67g、总挥发油62.2mL生药/kg体重的剂量配伍);b.养心通脉方原方组(YTⅠ组): YTⅠ灌胃,剂量3.125g/(kg•d);c.无药血清组(KX组):等体积蒸馏水灌胃。各组每只大鼠每次灌胃4mL,每日1次,连续5天。, 百拇医药(莫 莉 袁肇凯 黄献平 陈清华 简维雄 胡志希 孙贵香)