肾病Ⅰ号方对大鼠系膜细胞增殖及CTGFCOL-Ⅳ表达的影响(1)
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收稿日期:2009-11-24
基金项目:温州市科技计划项目(Y20070050 )
作者简介:胡振奋(1984-),男,浙江温州人,硕士研究生,研究方向:肾脏病的中西医结合治疗。
通讯作者:程锦国(1963-),男,浙江温州人,主任中医师,硕士研究生导师,研究方向:肾脏病的中西医结合治疗。
摘 要:目的:观察肾病Ⅰ号方(SBYHF)对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell, GMC)的增殖及表达IV型胶原(COL-Ⅳ)及结缔组织生长因子(CTGF)的影响,探讨其抗肾纤维化的机制。方法:通过体外培养GMC技术及体外药物血清实验方法 ,采用CCK-8法检测GMC的增殖,ELISA法检测COL-Ⅳ的分泌水平,RT-PCR法检测CTGFmRNA的表达。结果:肾病Ⅰ号方可显著抑制GMC的增殖(P<0.01),减少COL- Ⅳ的分泌和CTGF mRNA的表达(P<0.01)。结论:肾病Ⅰ号方可能通过减少GMC的COL- Ⅳ的分泌,下调CTGF mRNA表达,而抑制GMC增殖,从而发挥抗肾脏纤维化的作用。
关键词:肾病Ⅰ号方;系膜细胞;结缔组织生长因子;IV型胶原;实时荧光定量PCR
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1673-7717(2010)04-0863-03
The Effects of SBYHF on Proliferation and Expression of
COL-IV and CTGFin Rat Glomerular Mesangial Cells
HU Zhenfen,CHENG Jinguo,DONG Feixia,HUANG Weixia,CHEN Nianzhao,SHAO Sisi
(Wenzhou Hospital of TCM,Wenzhou 325000,Zhejiang,China)
Abstract:
Objective: To explore the molecular and cellular mechanism of SBYHF in ameliorating renal fibrosis through observing the effect of proliferation andexpression ofCOL-IV and CTGFin Rat Glomerular Mesangial Cells.Methods: The proliferation of Rat GMC fostered in SBYHF was detected by CCK-8, the COL-IV secretion was detected by ELISA, and the CTGF was detected by Real Time PCR. Results: SBYHF significantly inhibited GMC proliferation(P<0.01) and decreased the expression of COL-IV and CTGF (P<0.01). Conclusion: SBYHFmay through reduces the COL-IV secretion and down-regulated the expression ofCTGF to inhibit the proliferation of Rat Glomerular Mesangial Cells. This may be the mechanism of SBYHF in ameliorating renal fibrosis.
Key words:SBYHF ; glomerular mesangial cells; connective tissue growth factor; collagen IV; real time PCR
肾病Ⅰ号方(以下简称SBYHF)是温州市中医院肾内科临床常用方,为具有清利热湿、调和三焦的作用,在临床应用中对各种慢性肾脏疾病的治疗和延缓肾纤维化进展均有良好效果。本研究观察了肾病Ⅰ号方对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)的增殖和细胞外基质及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,冀以从细胞生物学水平探讨肾病Ⅰ号方延缓肾脏病进展的相关机制。现将研究结果报道如下。
1 材料和方法
1.1材料
1.1.1 药物肾病Ⅰ号方由柴胡、黄芩、半夏、白芍、土茯苓、半枝莲、菝葜、漏芦等组成,购于温州市中医院;洛汀新(盐酸贝那普利,Benazepril,规格:10mg/片):北京诺华有限公司生产,批号:X1191。
1.1.2 实验动物 健康雄性SD大鼠30只,体重(200±20)g,由温州医学院动物实验中心提供。
1.1.3 实验细胞大鼠肾小球系膜细胞株,购于中国典型培养物保藏中心公司 ......
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