冠心平对动脉粥样硬化金黄地鼠(2)
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参见附件。
2.3取材
给予治疗药物8周，末次给药2h后，10%水合氯醛3mL/kg腹腔注射，在麻醉状态下去胸腹部被毛，将金黄地鼠仰卧固定在手术架上，从腹正中线皮肤切开腹腔，使腹主动脉清楚暴露，用无菌注射器吸出血液，约4mL，防止溶血。分为两份，一份2mL在2h内完成离心，取上层血清于-20℃保存备用。另一份2mL注入含10% EDTA二钠30μL和抑肽酶40μL的试管中，混匀。4℃，3000r/min离心10min，分离血浆，于-20℃保存。测定前使样本置于室温中复融，再次4℃，3000r/min离心5min，取上清液测定。
2.4NO、NOS、AngⅡ检测
取血清按NO、NOS、AngⅡ各自试剂盒操作说明进行检测。
2.5ET检测
取血浆上清液，按ET试剂盒操作说明进行检测。
3实验结果
3.1冠心平对AS金黄地鼠血清NO、血浆ET含量的影响
高脂饲料喂养金黄地鼠建立冠状动脉粥样硬化后，模型组金黄地鼠与正常组相比，血清NO含量明显下降、血浆ET含量明显上升，具有显著性差异(P<0.01)，与临床指标吻合；经给予冠心平干预后，冠心平大、小剂量组以及辛伐他汀组金黄地鼠与模型组相比，血清NO含量显著升高，具有显著性差异(P<0.01)；血浆ET水平，冠心平大剂量组与模型组相比，ET含量降低，有显著性差异(P<0.01)；辛伐他汀组、冠心平小剂量组金黄地鼠与模型组相比，无显著性差异。见表1。
表1冠心平对AS金黄地鼠血清NO、血浆ET
含量的影响(n=10，±s)
组别剂量
(g/kg)NO(μmol/L)ET(ng/L)正常对照组NS6.56±1.3681.60±52.64模型对照组NS3.43±1.18△△301.60±69.21△△冠心平大剂量组16.757.24±1.62**216.81±51.11**冠心平小剂量组8.386.31±1.13**261.31±42.46辛伐他汀组0.0055.24±0.98**297.78±26.53注：与正常组比较，△△P<0.01；与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。
3.2冠心平对AS金黄地鼠血清NOS含量的影响
高脂饲料喂养金黄地鼠建立冠状动脉粥样硬化后，模型组金黄地鼠的血清NOS的水平明显增高，与正常组相比具有显著性差异(P<0.01)，与临床指标吻合；经给予冠心平干预后，冠心平大剂量组、小剂量组金黄地鼠与模型组相比， NOS的水平有不同程度的降低(P<0.05，P<0.01)；辛伐他汀组金黄地鼠的血清NOS的活力稍有降低，与模型组相比无显著性差异。见表2。
表2冠心平对AS金黄地鼠血清
NOS含量的影响(n=10，±s)组别剂量(g/kg)NOS(U/mL)正常对照组NS9.97±1.94模型对照组NS14.70±1.45△△冠心平大剂量组16.759.40±3.03**冠心平小剂量组8.3812.68±1.69*辛伐他汀组0.00513.33±2.01注：与正常组比较，△△P<0.01；与模型对照组比较，*P<005，**P<0.01。
3.3冠心平对AS金黄地鼠血清AngⅡ含量的影响
高脂饲料喂养金黄地鼠建立冠状动脉粥样硬化后，模型组金黄地鼠与正常组相比，血清AngⅡ含量明显上升，具有显著性差异(P<0.01)，与临床指标吻合；经给予冠心平干预后，冠心平大剂量组、辛伐他汀组金黄地鼠与模型组相比，血清AngⅡ含量降低，具有显著性差异(P<0.01，P<005)；冠心平小剂量组金黄地鼠与模型组相比，血清AngⅡ含量有所降低，但无显著性差异。见表3。
表3冠心平对AS金黄地鼠血清
AngⅡ含量的影响(n=10，±s)
组别剂量(g/kg)AngⅡ(ng/L)正常对照组NS478.82±162.54模型对照组NS998.82±276.76△△冠心平大剂量组16.75745.29±215.60*冠心平小剂量组8.38826.76±148.57辛伐他汀组0.005623.24± 168.82**注：与正常组比较，△△P<0.01；与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。
4讨论
血管内皮既是血管壁的重要组成部分，又作为庞大的内分泌系统[5]参与许多生理活动，它可以产生和分泌包括ET、NO、血管紧张素转换酶(ACE)在内的几十种生物活性物质，调节血管的舒缩状态，防止炎细胞浸润和有害物质渗入，调节血管平滑肌细胞生长和增殖。其中NO和ET是内皮细胞的两种重要物质，影响着血管舒缩功能的主要方面。
ET是由21个氨基酸组成的酸性多肽，是迄今发现的重要血管活性物质，由血管内皮细胞合成释放。内皮细胞损伤后，其分泌功能紊乱，ET合成、释放增加[6]。同时，血管内膜抗凝血功能明显减弱、凝血和抗凝动态平衡严重失调，导致血栓形成。ET增多时，一方面直接收缩冠状动脉，加重心肌缺血[7]。另一方面进入血液循环，引起全身动静脉收缩，升高血压，造成恶性循环同时促进AS发生、发展[8]。
NO是一种具有多种生物学活性的小气体分子，半衰期极短，且不稳定，是内皮衍生的舒张因子，具有强大的舒张血管、抑制血小板的聚集与激活、抑制中性粒细胞与单核细胞对血管壁的浸润与吸附、抑制血管平滑肌细胞增殖和抗血栓形成的作用。NO通过鸟苷酸环化酶中铁原子作用，激活鸟苷酸环化酶，升高细胞内鸟苷酸环化酶，使血管平滑肌舒张[9]。
NOS对AS来说具有双重作用,一方面,它可调节NO的生成、维持正常水平的NO浓度及内皮功能;另一方面,为促AS作用,在AS时NOS可使NO及其过氧化物同时产生,且高脂血症可使过氧化亚硝酸盐产生增加、浓度升高,而高浓度的过氧化亚硝酸盐可使OH-产生增加、具有细胞毒性[9]。
AngⅡ具有强大的血管收缩作用，能够维持血压和重要脏器的血供，增加回心血量，使心排血量增加，但AngⅡ分泌长期升高会诱发氧化反应，引起血管内皮的氧化损伤[10]。
我们在前期的研究中发现，冠心平含药血清能够显著降低氧化刺激状态下内皮细胞培养液中ET的水平(P<0.05)，TNF-α水平(P<0.05)，以及IL-1含量(P<0.05)，我们推测冠心平可能是通过减少ET的合成 ......
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