应用Reak-time PCR对基因芯片结果的验证分析(2)
荧光实时 RT-PCR技术最早是在1992年由日本人 Higuchi提出,该方法可以对待测样品中的目标基因进行准确定量 。real-time PCR 发展早期就是运用最简单的方法,在PCR 反应体系中,加入过量SYBR green 1[8]荧光染料,SYBR green 1荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号。在PCR反应体系中加入过量的该染料,扩增过程中随着反应的进行合成的dsDNA增多,结合的染料增多,荧光强度也就增加,通过测定各反应管的荧光信号与荧光域值线的交叉点所对应的循环次数(指数扩增的开始阶段,即循环阈值(Ct)反映样品中目的基因的起始模板数。该方法利用Ct的概念 ......
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