舒血宁注射液对COPD患者血液HMGB1及血清C反应蛋白含量的影响(2)
1.3.2 外周血标本获取:患者晨8时空腹采静脉血,部分全血保存,部分离心取血清,置-20℃冰箱保存待测。
1.3.3 免疫印迹法(WB法)测定血液HMGB1水平:提取全血总蛋白,Lowry法测蛋白含量,1∶1体积与上样缓冲液混合,取20 μl上样。浓缩胶电泳电压为100 V,分离胶电泳电压为130 V,电泳4 h后PVDF膜转印,15 V常温作用20min。PVDF膜5%牛血清白蛋白PBS液封闭1h,然后加入兔抗人抗体HMGB1抗体(1∶1000 Santa Cruz)4℃过夜,TBS洗膜10 min×4,HRP标记山羊抗兔IgG(1∶5000)室温反应1h,化学发光法显色,凝胶分析系统分析条带光密度。
1.3.4 血清CRP含量检测:采用酶联免疫吸附法(ELISA法)测定(试剂盒购自晶美生物工程公司),严格按操作说明书进行。
1.3.5 血清SOD活性、MDA水平测定:采静脉血2.5 ml,采用比色法测定血清中SOD活性和MDA水平,按试剂盒说明书(南京建成生物工程研究所)进行操作。
1.4 统计学处理:所得数据以表示,采用SPSS10.0软件包进行t检验分析。
2 结果
2.1 治疗后肺功能测定结果:治疗组患者 FEV1及FEV1%均显著上升 ......
您现在查看是摘要页,全文长 5034 字符。