大肠癌患者血清中BCRP的表达与化疗疗效的关系(2)
1.1.2 健康成人血清:抽取40例健康成人志愿者血清作为正常对照,男25例,女15例,年龄28~66岁,平均47岁。
2 仪器、试剂、方法
2.1 主要试剂:鼠抗人BCRP单克隆抗体,固定打孔试剂、FITC标记抗鼠IgG(同型阴性对照)均由美国BD公司生产。
2.2 BCRP检测方法:化疗前取患者新鲜静脉血5 ml,肝素(107 u/L)抗凝,PBS稀释1倍,Ficoll淋巴细胞分离液4 ml,1 000 r/min,离心30分钟,分离出单个核细胞,PBS液洗涤3次,取适量细胞加Intern prep Rengent 1 100μl,固定15min后PBS洗涤,加Intern prep Rengent 2 100μl,10min后PBS调整细胞浓度,以每管5×105个细胞分至两个试管中,然后一管加BCRP单克隆抗体 ......
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