核酸扩增荧光免疫检测对二期梅毒患者的诊断意义
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【摘要】目的：探讨核酸扩增(PCR)荧光免疫检测二期梅霉患者的诊断意义。方法：筛选34例有典型二期梅毒皮损患者的空腹血清，同时进行梅毒血清反应(RPR)、梅毒螺旋体血液凝集(TPHA)和PCR梅毒螺旋样检测。结果：34份血清中RPR阳性28例，TPHA阳性32例，PCR检测结果阳性1例，与RPR比较差异有显著性﹙P<0.01)；与TPHA比较，差异有显著性﹙P<0.01)。结论：PCR应用二期梅毒患者荧光免疫检测无临床意义。
【关键词】二期梅毒；血清学检查；核酸扩增免疫检测
文章编号：1009-5519(2008)01-0045-02 中图分类号：R446 文献标识码：A
血清学实验仍然是目前梅毒诊断主要方法。对于伴有典型皮损的二期梅毒患者，极大部分都可确诊，由于RPR技术的应用迅速发展和快速特异性高，我们应用核酸扩增荧光免疫检测二期梅毒患者血清梅毒螺旋体梅毒血清学检查比较其诊断意义。
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1 材料与方法
1.1 临床标本：收集我院皮肤科门诊2002年2月～2004年10月间具有典型二期梅毒皮损的患者，其中男21例，女13例。年龄21～46岁。夫妻同时感染的8例，有一期梅毒史5例。皮损表现为玫瑰糠疹样皮损14例，掌跖脱屑性红斑11例，银屑病样皮损3例，肛周扁平湿疣3例，大小阴唇扁平湿疣2例，梅毒性脱发1例。取34例患者空腹血清同时分别做RPR、TPHA和PCR检测。
1.2 方法：抽取34例患者的空腹血清同时分别进行RPR，TPHA和PCR；PCR试剂，由中山大学达安基因股份有限公司生产，梅毒血清学检查试剂由上海草盛生物技术有限公司生产。按照试剂盒使用说明书操作。
2 结果(见表1)
3 讨论
PCR方法具有特异性很强，敏感性很高并具有快速等特点，因此应用较广泛。特别是对于支原体和衣原体和病毒的诊断有较大临床意义。对于梅毒螺旋体的诊断，由于传统的梅毒血清学检查和梅毒螺旋体暗视野显微镜诊断具有极好的临床诊断意义，在PCR应用方面较少，应用复合RPR方法检测生殖器溃疡中梅毒51例，检查结果分别与暗视野显微镜及梅毒血清学试验结果比较，均有较好的一致性，kappa值分别为0.5%和0.73%。刘爱英[11等应用聚合酶链PCR反应检查结果与暗视野显微镜检查结果比较，差异有显著性P<0.01，与梅毒血清检查结果比较差异无显著性(P>0.05)；应用巢式PCR扩增131份拟为梅毒血清标本、血清学方法与巢式DOLA、RPR差异具有无显著性。徐瑾、张顺[2]报道梅毒螺旋体荧光定量PCR检测方法检测梅毒非特异性抗体，阳性率为45.1l%，TPHA方法检测梅毒特异性抗体，阳性率为52.9%，两者阳性率都较低[3]。史俊岩、刘兵报道免疫PCR法检测梅毒螺旋体特异性抗体120份。其敏感性是相同条件下ELISA法的104倍。另外，免疫PCR法检测120份梅毒患者血清特异性抗体阳性率为81.7%，而LISA法阳性率为59.2%。经χ2检验，二者的阳性检出率有显著差异，结果说明免疫PCR法阳性检出率高于ELISA法[4]。彭石潜、周华报道2例胎盘组织荧光PCR诊断早期先天梅毒先人梅毒在研究中采用了荧光定量PCR技术来检出胎盘组织中的梅毒螺旋体的DNA，以探讨荧光定量PCR技术在先天梅毒诊断中的价值。结果与常规血清临床综合综合诊断方法进行比较。通过统计分析显示在诊断先天梅毒新生儿时。荧光定量PCR至少有不低于综合常规诊断方法的价值。而优于临床症状。这对于提高病人梅毒的检出率，减少漏诊的发生有积极的意义。本院34例具有典型梅毒皮损患者，本组34例空腹血清应用核酶扩增荧光免疫检测，结果PCR与血清学RPR比较有差异有显著性P<0.01，与TPHA差异有显著性P<0.01。分析原因：实验室条件是合格的，试剂亦是合格试剂，与其他作者差别巨大，二期梅毒患者血清螺旋体没有或极少有关，还是二期梅毒患者体外血清对梅毒螺旋体有无活作用(标本保存时)，因此本科特别做好8例有典型梅毒硬下疳和同侧淋巴结肿大的二期梅毒患者，分别取硬下疳分泌物做RPR和TPHA检查，结果8例PCR阳性，8例RPR阳性，8例TPHA阳性，说明试剂和操作方法和完全都无大问题。以上原因望同行进一步分析。
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参考文献：
[1] 刘爱英.聚合链反应对一期梅毒的诊断[J].临床皮肤科杂志，2004，7：413.
[2] 徐 瑾，张 顺.梅毒螺旋体荧光定量PCR检测方法的建立和初步临床应用[J].江西医学检验，2005，23(6)：529.
[3] 史俊岩，刘 兵.免疫PCR法检测梅毒螺旋体特异性抗体[J].微生物学杂志，2006，26(5)：23.
[4] 彭石潜，周 华，张 荣，等.胎盘组织荧光PCR诊断早期先天梅毒的研究[J].中国热带医学，2005，5(3)：443.
收稿日期：2007-09-21, 百拇医药(郭 强)