兔抗乐果抗血清制备的初步实验研究(2)

http://www.100md.com 2008年4月1日 张文元　杨亚冬　房国坚

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     农药残留的免疫分析法是近年来发展起来的分析技术，其突出优点是前处理过程大为简化，并能达到快速、简便的现场检测要求，正成为一个研究热点[6，7]，并显示出独特优势。一般情况下，结构较复杂(如含有环状结构)、分子量较大的半抗原在进一步实验中较易获得免疫成功。Chappey等[8]研究表明，分子量小于300的半抗原难以获得高亲和力的抗体。尤其是没有环状结构(如没有芳香环、杂环等)或结构不够复杂的半抗原更难于诱导动物产生抗体。但也有获得成功的。Tuomola等[9]用一个分子量很小的化合物(分子量为131.2)3-甲基吲哚的羰基与适当较长的连接臂连接，合成9个半抗原，通过进一步实验、筛选得到特异性单克隆抗体。草铵膦(Glufosinate)是分子量很小的除草剂，利用衍生协同的免疫分析法(DAIA)，通过同型双功能交联剂辛二酸双(N-羟基琥珀酰亚胺酯)成功构建N-乙缩醛草铵膦活性半抗原[10]。甲胺磷为无环状结构的有机磷农药，孙远明等[11]偶联氧、硫********到牛血清白蛋白上，通过实验成功制备分泌抗甲胺磷抗体的单克隆细胞株，获得了好的免疫效果，并可用于检测甲胺磷的研究。董国伟等[12]制备出高效价的兔抗甲胺磷的多克隆抗体。

    乐果是最广泛使用的有机磷农药之一，乐果分子量小，为229，且分子内无环状结构，其残留量主要是通过理化分析方法检测，尚未见免疫分析法的报道。本实验尝试利用生产乐果的中间体硫磷酯与1，4-二氨基丁烷反应合成乐果半抗原，再将半抗原与载体蛋白连接后合成人工抗原。通过人工抗原免疫兔子，制备抗乐果抗血清抗体 ......

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