淋病奈瑟菌沙眼衣原体及解脲支原体感染检测结果分析
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【摘要】目的：调查本地淋病奈瑟菌、沙眼衣原体及解脲支原体临床感染现状，为临床诊断治疗提供可靠依据。方法：近3年来在我院门诊就诊患者获取泌尿生殖道标本5 008份，其中男性标本2 759份，女性标本2 249份。培养法检测淋病奈瑟菌和解脲支原体，单克隆抗体免疫荧光法检测沙眼衣原体，或男性急性尿道炎患者用直接涂片革兰染色检测淋病奈瑟菌。结果：共检测标本5 008份。男性2 759份，三种病原体阳性共633份，检出阳性率22.9%；女性2 249份，三种病原体阳性共433份，检出阳性率19.3%。在3年中淋病奈瑟菌总的阳性率4.4%，沙眼衣原体阳性检出率3.9%，解脲支原体阳性检出率13%。1 066份阳性标本中，患者年龄分布40岁104例占9.8%。结论：对疑为泌尿生殖道感染患者，应同时进行三种病原体的检测，防止性传播疾病的蔓延。
【关键词】淋病奈瑟菌；沙眼衣原体；解脲支原体；检测分析
文章编号：1009-5519(2008)13-1962-02 中图分类号：R446 文献标识码：A
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我们于2000~2002年对自述泌尿生殖道感染的门诊患者开展了淋病奈瑟菌(NG)、沙眼衣原体(CT)及解脲支原体(UU)的检查，现将结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源:按常规方法女性取宫颈分泌物，男性取尿道分泌物、前列腺粹等标本。近3年来在我院门诊就诊患者共获取泌尿生殖道标本5 008份，其中男性标本2 759份，女性标本2 249份。
1.2 实验材料
1.2.1 试剂：TM淋病奈瑟菌分离培养基(浙江军区卫生防疫站)；解脲支原体液体培养基(广州万孚生物研究所)；单克隆抗体免疫荧光法沙眼衣原体特异性诊断试剂盒(军事医学科学院病毒所)；革兰氏染液(自配)。
1.2.2 器材：消毒男性拭子及女性拭子、载玻片、甲醇、染色湿盒。
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1.2.3 仪器： 孵育箱、荧光显微镜、光学显微镜，旋转式振荡器。
1.3 方法：接种：将消毒棉拭子所有的标本按淋病奈瑟菌，沙眼衣原体及解脲支原体的顺序依次接种。(1)在TM培养基上分区划线；(2)再将标本涂在无菌的载玻片上，以甲醇固定10 min，取出后于空气中充分挥发；(3)最后将取有标本的棉拭子放于解脲支原体液体培养基中轻轻搅动后取出。
1.3.1 分离培养和鉴定：(1)接种后将TM培养基置于37 ℃，5%~10% CO2环境下孵育，18~24 h后，可形成直径约0.5~1 mm、灰白色、光滑、半透明、呈露滴状的圆形凸起菌落。可疑菌落先用氧化酶(+)试验证实，然后作生化和免疫鉴定。(2)将固定在玻上的标本加抗衣原体荧光抗体25 uI，放入湿盒中，密盖，置37 ℃温箱孵育30 min，用含吐温80的磷酸盐缓冲液入洗槽中，放旋转式振荡器振荡洗涤5 min，共3次，吹干，滴缓冲甘油作镜油，于荧光显微镜下检查。查见亮绿色，具有典型大小，边界清晰的圆形颗粒、柱状细胞内可见亮绿色包涵体，可报告“衣原体荧光抗体染色阳性”。(3)解脲支原体液体培养基置于35 ℃孵育24 h，观察液体呈红色清亮即为阳性；若不变色，再放24 h观察，红色、清亮为阳性，不变色为阴性。(4)将已固定的细菌涂片，按常规革氏染色后镜检。若男性急性尿道炎患者的脓性分泌物中呈现中性粒细胞内外有G-双球菌，可报告为“查见G-双球菌(细胞内外)，”具有诊断价值。
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2 结果
2.1 近3年来共计检测标本5 008份，男性2 759份，3种病原体阳性共633份，检出阳性率22.9%；女性2 249份，3种病原体阳性共433份，检出阳性率19.3%。
2.2 1 006份阳性标本中，患者年龄分布：40岁104例占9.8%。3种病原体在不同性别人群中的检出结果见表1。
2.3 在检出的1 006例中NG阳性218例占20.5%，CT阳性196例占18.4%，UU阳性652例占61.1%。
2.4 各种病原体混合感染情况：NG与CT混合感染为18例，阳性感染率1.7%，其中男8例，女10例。NG与UU混合感染37例，阳性感染率3.5%，其中男13例，女24例。CT与UU混合感染为30例，阳性2.8%，其中男20例、女10例。NG、UU与CT混合感染为1例。
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3 讨论
3.1 随着国内外交往日益频繁，性意识和性行为的改变，性传播疾病已成为常见疾病，因此，开展性病防治、性病监测及开展新的检测技术早期诊断，提高检出率是卫生工作者的重点。
3.2 由于男、女生理上的差异，淋病在男性的临床特征明显，在门诊直接用脓液涂片革兰氏染色，阳性检出率可达90%以上，无需再做细菌培养。而女性淋病患者，细菌培养有十分重要的意义。
3.3 本文对3年来我院性病门诊疑为泌尿生殖道感染患者5 008例。分别或同时进行NG、CT、UU的检测，病原检测阳性者1066例，占被检人数的21.3%，阳性率由高到低为UU(13%)>NG(4.4%)>CT(3.9%)。UU与NG、CT有显著性差异(P<0.05)，该结果说明本地区泌生殖道感染就诊患者淋病、非淋菌性尿道炎感染不容乐观。本结果与文献报道淋菌感染的STD占首位，有所区别[1]。
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3.4 三种病原体的检出中，阳性检出的最小年龄为4岁，最大为70岁，青壮年是阳性检出的主体；大多集中在20~40岁，占总检出标本的81.1%。应加强这一年龄段的健康教育，以提高人们的文化素质、法制观念、性道德观念以及健康性行为知识和自我保护意识[2]。
3.5 从表1可见，淋病奈瑟菌、沙眼衣原体及解脲支原体混合感染普遍，所以对尿道炎患者应同时进行三项联检测，防止漏诊或误诊现象出现。
参考文献：
[1] 于中丽，党 肯.非淋球菌性病尿道炎病原体构成分析[J].陕西医学检验，2000，15(1)：19.
[2] 梁东春，鲍秋野，张镜宇.一种快速从组织中提取DNA的方法[J].天津医科大学文报，2002，8(1)：105.
收稿日期：2008-02-27, 百拇医药(荆成宝 张善弟 黄 宁)