曹 静，王云杰，李俊生(. 临沂市人民医院药学部，山东 临沂76003；. 临沂经济技术开发区人民医院，山东 临沂7603)

    异源三聚体鸟苷酸调节蛋白(G 蛋白)信号通路在正常肝组织生长和再生中起着重要作用[1]，而在肝癌组织中G 蛋白的表达和功能均失常[2]。鉴于G 蛋白的表达和功能对正常肝细胞及肝癌细胞均有十分重要的作用，作者设想G 蛋白信号转导调节因子(regulator of G protein signalling，RGS)在调节肝细胞癌形成的过程中可能也起着同样重要的作用。2013 年1～10 月，作者从体外细胞株和裸鼠体内2 个层面观察了RGS17 在正常肝细胞和肝癌细胞株的表达，探讨其在肝细胞癌发生和发展中的作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞及动物 肝癌细胞株HepG2、HuH7 及正常肝细胞株THLE-2(上海交通大学上海市肿瘤研究所惠赠)；无特定病原体(SPF)4 周龄雄性裸鼠10 只[购于上海斯莱克动物中心，批号SCXK(沪)2012-0002]。

    1.1.2 主要试剂与仪器

    1.1.2.1 主要试剂 细胞培养用胎牛血清(美国Gibco 公司原装进口)和DMEM 培养基(杜氏改良培养基，美国Gibco 公司产品)；实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)两步法试剂盒及逆转录酶(日本Takara 公司产品)；Trizol 试剂(美国Invitrogen 公司产品)；引物(上海生工有限公司合成)；焦磷酸二乙酯(DEPC)水(购自杭州碧云天公司)；氯仿(购自Sigma 公司)；异丙醇(购自德国Merck 公司)；抽提RNA 用无RNA 酶EP 管和real-time-PCR 管(购自美国Axygen 公司)；CCK-8 试剂(日本同仁公司生产，原装进口)。

    1.1.2.2 主要仪器 细胞培养皿和96 孔培养板(美国Corning 公司)；5%CO2细胞培养箱和处理细胞用超净工作台(EQR/GL-65，美国Thermo 公司生产)；逆转录聚合酶链反应仪(美国Bio-Rad 公司生产)；real-time-PCR 仪(美国ABI 公司生产)。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养 肝癌细胞株HepG2、HuH7 及正常肝细胞株THLE-2 用DMEM 细胞培养液及10%胎牛血清培养，培养液中加入青霉素(100 μg/mL)和链霉素(50 μg/mL)以防止细胞污染。细胞在37 ℃、5%CO2无菌细胞培养箱中培养(时间不固定 ......