徐律韵(东南大学医学院附属南京同仁医院急诊科，江苏南京211102)

    肝癌是常见的恶性肿瘤之一，其发病率和病死率高，总体预后差。究其原因，主要是由于肝癌具有极高的转移复发率。从一定程度上讲，抑制肿瘤细胞的黏附和侵袭可以控制或降低肿瘤转移的发生[1]。黏着斑激酶(focal adhesion kinase，FAK)是一种非受体型酪氨酸激酶，在包括肝癌在内的多种肿瘤中表达，对肿瘤的黏附、迁移、侵袭等行为起着重要的调控作用[2-3]。紫杉醇(paclitaxel)是从红豆杉属植物紫杉的树皮和树干中提取并开发利用的天然抗癌药物，既往研究发现，紫杉醇通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用[4-5]，但其他抗肿瘤机制有待进一步阐明。本研究选用人肝癌细胞株SMMC-7721 作为研究对象，观察紫杉醇对该细胞的黏附及侵袭转移潜能的影响，进一步阐明紫杉醇新的抗肿瘤机制。

    1 材料与方法

    1.1 仪器与试剂 紫杉醇，购自上海华联制药有限公司，使用时用0.9%氯化钠溶液稀释至所需浓度。人肝癌细胞株SMMC-7721、鼠成纤维细胞株NIH3T3 购自中国医学科学院上海细胞库。RPMI 1640 培养基(美国Gibco 公司)，小牛血清(杭州四季青公司)，胰蛋白酶、四甲基偶氮唑蓝(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)(美国Sigma公司)，鼠抗人FAK 抗体、羊抗鼠多克隆二抗(美国Santa Cruz 公司)，Transwell 小室(美国Corning 公司)，Matrigel 胶、电泳仪(美国BD 公司)，酶标仪(美国BIO-RAD 公司)。

    1.2 实验方法

    1.2.1 细胞培养 SMMC-7721 及NIH3T3 细胞均培养于含10%小牛血清、青霉素100 U/mL、链霉素150 μg/mL 的RPMI 1640 培养基中，37 ℃、5%CO2培养箱内培养，0.25%胰蛋白酶消化传代。

    1.2.2 体外细胞-基质黏附实验 每孔30 μL Matrigel 胶包被96孔板，成胶后加入浓度为5×105mL-1的SMMC-7721 细胞悬液100 μL。待细胞贴壁后加入不同浓度的紫杉醇，终浓度分别为10、20、40 nmol/L(紫杉醇组) ......