杜仲总黄酮体外抗乙型肝炎病毒的实验研究
拉米夫定,拷贝数,细胞培养,1材料与方法,2结果,3讨论
余 晓,罗 果(遵义医学院:.生物化学教研室;.医学与生物学研究中心,贵州遵义563000)杜仲是中国特有的名贵中药材和工业原料树种。研究表明,杜仲含许多有效药用成分,如黄酮类、木脂类、萜类、糖类、生物碱和抗真菌蛋白等[1],其中黄酮类化合物具有抗病毒、抗衰老、抗氧化、抑菌、降脂减肥[2]、抗癌防癌等作用[3]。
乙型肝炎是由嗜肝的乙型肝炎病毒(HBV)引起的一种在世界范围的传染性疾病,全世界约有3.5亿人感染HBV,我国约占一半。乙型肝炎给人类健康造成极大的危害,寻求高效低毒的抗HBV的天然药物已经刻不容缓[4]。本实验拟用转染HBV的人肝癌细胞HepG2.2.15作为研究对象[5],观察杜仲总黄酮抗HBV的效果,为杜仲抗HBV的药效成分筛选以及杜仲天然产物的开发利用提供一定的理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.1.1 材料 杜仲皮采自贵州省正安县田生村。转染HBV的人肝癌细胞系HepG2.2.15购自中国典型培养物保藏中心。
1.1.2 试剂 HBV荧光定量试剂盒(达安基因公司);DMEM细胞培养液(GIBCO公司);乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)试剂盒(华美公司);胎牛血清(四季青公司);芦丁标准品(中国药品生物制品检定所,批号:100080-200806)。拉米夫定[葛兰素史克制药(苏州)有限公司,批号:10090046]。
1.1.3 主要仪器 荧光定量PCR仪(美国Bio-Rad公司);ELX800通用酶标仪(美国Bio-techInc公司);CO2孵箱(美国Thermo公司) ......
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