张莉莉，梁国强，陈伟

    (1.苏州市市立医院本部药剂科门诊药房，江苏215000；2.苏州市中医医院吴门医派研究院，江苏215000)

    大孔树脂联用硅胶柱色谱法富集制备人工蛹虫草中虫草素的工艺研究

    张莉莉1，梁国强2，陈伟2

    (1.苏州市市立医院本部药剂科门诊药房，江苏215000；2.苏州市中医医院吴门医派研究院，江苏215000)

    目的优选一种简单快捷分离制备人工蛹虫草中虫草素的工艺。方法首先考察7种不同极性的大孔树脂，优选出最佳吸附树脂，然后对树脂富集虫草素的吸附量、洗脱剂浓度、洗脱体积等工艺进行考察，最后对硅胶柱洗脱剂比例等条件进行考察，优选出最佳的硅胶柱分离洗脱剂。结果根据实验考察数据得出最佳工艺条件：大孔树脂型号为HPD-D，树脂对虫草提取液(0.1 mg/mL)的吸附量为2树脂床体积(2BV)，用20%乙醇，洗脱体积为3BV可将虫草素洗脱完全，硅胶柱洗脱剂为乙酸乙酯∶丙酮(2∶1)，分离制得虫草素晶体纯度约为93.60%。结论优选出的人工蛹虫草中虫草素的富集分离工艺简单快捷，适用于大规模生产制备虫草素。

    虫草素/分析；冬虫夏草/化学；色谱法，高压液相；树脂类，合成

    蛹虫草，又名北冬虫夏草，与冬虫夏草同属异种[1]。蛹虫草内含有虫草素、虫草酸、多糖、腺苷等多种有效成分。《新华本草纲要》称，蛹草有益肺肾、补精髓、止血化痰的功能[2-3]。有药理研究表明，虫草素是一种腺苷类活性物质，具有抗菌、抗病毒、干扰人体RNA及DNA合成，明显抑制多种肿瘤生长的作用[4-7]。

    目前对虫草素的分离制备主要采用单一硅胶色谱法，分离较困难，无法实现工业化生产，本研究考查不同型号大孔吸附树脂对虫草素的吸附效果，并首先用大孔树脂对人工蛹虫草中虫草素进行富集，联用硅胶柱色谱对虫草素分离制备，降低虫草素的分离难度，为虫草素大规模生产制备提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料人工蛹虫草购置于南通市海安县泓寿生物科技有限公司，经南京中医药大学吴启南教授鉴定为人工蛹虫草。大孔树脂D101、HPD-417、HPD-600、AB-8、HPD-800、HPD-100、HPD-D均购于河北沧州宝恩吸附树脂厂，薄层层析硅胶HG/T2354-92为化学纯，购于青岛海洋化工有限公司。加压层析柱(40 cm×6cm，瑞士BUCHI公司)，广性pH试纸(上海化学试剂总厂)，试剂均为分析纯，BUCHI旋转蒸发仪(瑞士BUCHI公司)，Aglient1110型高效液相色谱仪(美国安捷伦公司) ......