彭 瑛，邓正华，温先勇

    (泸州医学院附属医院检验科，四川泸州646000)

    慢性乙型肝炎患者治疗前后乙型肝炎病毒YMDD突变情况分析

    彭 瑛，邓正华，温先勇

    (泸州医学院附属医院检验科，四川泸州646000)

    目的采用Taqman荧光探针技术对慢性乙型肝炎(乙肝)患者血清中乙肝病毒P基因区550位点的突变情况进行检测，对该院慢性乙肝患者乙肝病毒YMDD突变情况进行调查，为指导临床使用拉米夫定对乙肝患者进行治疗提供重要的参考依据。方法2013年2～12月选取HBVDNA定量在2.00E+03 IU以上的慢性乙肝患者186例，其中90例未经过治疗(未治疗组)，96例使用拉米夫定治疗1年以上(治疗组)。其血清采用聚合酶链式反应结合Taqman荧光探针技术，分C、I、V三组，分别对总HBVDNA(包括野生型和突变型DNA)，YIDD突变DNA，YVDD突变DNA进行检测。结果186例慢性乙肝患者中发生P基因区变异者共87例，其中治疗组患者发生YIDD变异9例(9.4%)，发生YVDD变异36例(37.5%)，YIDD和YVDD同时变异6例(6.2%)；未治疗组患者发生YIDD变异6例(6.7%)，发生YVDD变异24例(26.7%)，YIDD和YVDD同时变异6例(6.7%)。两组患者YIDD变异、YVDD变异及YIDD和YVDD同时变异发生情况比较，差异均无统计学意义(χ2=0.011、0.156、0.206，P>0.05)。结论经过拉米夫定治疗的患者乙肝病毒P基因区发生变异的频率高，但未经治疗的慢性乙肝患者体内的乙肝病毒也可自然发生P基因区的变异，故在治疗前及治疗中进行耐药基因的检测对指导临床治疗用药具有重要意义。

    肝炎，乙型，慢性； 肝炎病毒，乙型； 拉米夫定； DNA，病毒

    拉米夫定是核苷类抗病毒药物，已广泛应用于慢性乙型肝炎患者的抗病毒治疗，它与乙型肝炎病毒(HBV)多聚酶结合后，竞争性抑制多聚酶活性，使HBVDNA链的合成终止，从而有效地抑制HBV DNA的复制[1]。但是长期服用拉米夫定的患者会引起病毒变异而产生耐药性。经研究发现，变异主要发生在HBV DNA多聚酶酪氨酸(Y)、甲硫氨酸(M)、天门冬氨酸(D)、天门冬氨酸(D)，即YMDD基序区，即由异亮氨酸(I)取代甲硫氨酸(M)和由缬氨酸(V)取代甲硫氨酸(M)产生YIDD和

    YVDD变异[2]。本研究采用聚合酶链反应(PCR)荧光法定性检测乙型肝炎患者血清中与拉米夫定耐药有关的HBV DNA多聚酶基因YMDD突变(YMDD变异为YIDD或YVDD ......