温海滨，覃 勋，蒙如庆，唐峰年，韦 喆，谭 宁

    (1.河池市人民医院肾内科，广西547000；2.桂林医学院科学实验中心，广西桂林541001)

    乌司他丁对氧化损伤肾小管上皮细胞的保护作用研究

    温海滨1，覃 勋1，蒙如庆1，唐峰年1，韦 喆1，谭 宁2

    (1.河池市人民医院肾内科，广西547000；2.桂林医学院科学实验中心，广西桂林541001)

    目的探讨乌司他丁对氧化损伤后肾小管上皮细胞的保护作用。方法将肾小管上皮NRK52E细胞随机分为八组，即N组：正常对照组，H组：500 μmol/L过氧化氢(H2O2)，A组：100 U/mL乌司他丁，B组：200 U/mL乌司他丁，C组：400 U/mL乌司他丁，D组：500 μmol/L H2O2、100 U/mL乌司他丁，E组：500 μmol/L H2O2、200 U/mL乌司他丁，F组：500 μmol/L H2O2、400 U/mL乌司他丁。检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量，观察细胞氧化损伤情况，以CCK-8法检测细胞的增殖活性，以流式细胞术检测细胞凋亡，以反转录聚合酶链反应检测Caspase-3基因的表达。结果H组细胞凋亡率明显高于N、A、B、C组，差异均有统计学意义(P<0.05)；E、F组凋亡率明显低于H组，差异均有统计学意义(P<0.05)；H组SOD活力较其他各组明显降低，MDA含量较其他各组明显升高，差异均有统计学意义(P<0.05)；与N组比较，H组Caspase-3 mRNA的表达明显增高，差异有统计学意义(P<0.05)；与H组比较，A、B组Caspase-3 mRNA的表达降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论乌司他丁能显著抗氧化，抑制细胞凋亡，乌司他丁预处理对H2O2诱导肾小管上皮细胞氧化应激损伤有保护作用，其作用机制可能与其可下调Caspase-3表达有关。

    过氧化氢；创伤和损伤；上皮细胞；肾小管；乌司他丁；氧化应激

    急性肾损伤(AKI)是目前临床住院患者常见并发症，其中肾小管的缺血再灌注损伤是主要的病理生理表现，肾小管上皮细胞凋亡与氧化应激损伤在AKI病理生理过程中的作用逐渐受到关注[1]。过氧化氢(H2O2)用于建立细胞氧化损伤的应激模型已得到广泛应用，如应用在血管内皮细胞和心肌细胞[2-3]。乌司他丁是一种新型酶抑制剂，可抑制多种蛋白酶活性、稳定溶酶体膜、清除氧自由基、抑制炎症介质释放，可保护危重症患者的肾功能[4]，但其具体机制尚未明确。本研究利用H2O2刺激肾小管上皮NRK52E细胞 ......