晏 容，刘 云，朱欣婷，易小飞，刘 流，李晓飞

    (1.遵义医学院基础医学院，贵州 遵义563003；2.遵义医学院医学与生物学研究中心，贵州遵义563003；3.贵州省普通高等学校特色药物肿瘤防治特色重点实验室，遵义563003)

    不同斑蝥素类物质对人肝癌细胞HepG2增殖作用的研究

    晏 容1，3，刘 云2，3，朱欣婷1，3，易小飞1，刘 流1，李晓飞1，3

    (1.遵义医学院基础医学院，贵州 遵义563003；2.遵义医学院医学与生物学研究中心，贵州遵义563003；3.贵州省普通高等学校特色药物肿瘤防治特色重点实验室，遵义563003)

    目的 观察斑蝥素酸镁、斑蝥素及斑蝥素酸钠3种斑蝥素类物质对人肝癌细胞HepG2的体外抗肿瘤活性。方法 (1)采用磺酰罗丹明染色法(SRB法)检测不同浓度斑蝥素酸镁、斑蝥素及斑蝥素酸钠在体外对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用；(2)使用透射电镜观察2.27 μmol/L斑蝥素酸镁作用于肝癌细胞HepG248 h后细胞超显微结构的变化。结果 (1)斑蝥素酸镁、斑蝥素及斑蝥素酸钠对人肝癌细胞HepG2有明显抑制作用，抑制率随药物浓度的增加而升高，且呈剂量效应关系，其半数抑制浓度(IC50)分别为2.27、5.70、8.41 μmol/L；(2)透射电镜下见核染色质聚集成块附着于核膜下，且见核异形等凋亡细胞形态特征。结论 斑蝥素酸镁对人肝癌细胞HepG2的抑制作用优于斑蝥素和斑蝥素酸钠，且斑蝥素酸镁可以诱导人肝癌细胞HepG2发生凋亡。

    斑蝥素/类似物和衍生物； 比色法； 肝肿瘤； 免疫组织化学； 染色与标记； 细胞凋亡； 肿瘤细胞，培养的

    中药昆虫芫菁体内的斑蝥素被认为是抗癌的主要有效物质，其可治疗原发性肝癌、喉癌、食管癌、宫颈癌等[1]。一直以来人们认为斑蝥素在斑蝥体内的存在形式只有一种游离态，但本研究发现，在斑蝥体内存在游离斑蝥素和结合斑蝥素2种形式[2]，并且常用中药斑蝥(大斑芫菁和眼斑芫菁)体内的结合斑蝥素多数为斑蝥素的盐类衍生物[3]，根据用药的临床经验推测，这些盐类衍生物具有更好的抗肿瘤作用。为了证实这一推测，本研究以提取眼斑芫菁体内的斑蝥素为原料，自主合成了斑蝥素酸镁、斑蝥素酸钠2种盐类衍生物，并对其体外抗肿瘤活性进行研究，以期获取更好的具有较大价值的抗癌药物。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 药物来源 斑蝥素由产自贵阳的眼斑芫菁提取并纯化[4](纯度大于或等于98%)；斑蝥素酸镁、斑蝥素酸钠由自制斑蝥素合成而来[5] ......