屠海燕，寿张飞(.浙江大学医学院附属第二医院肾脏内科，浙江杭州3000；.浙江大学医学院附属第一医院肾脏内科，浙江杭州3000)

    妊娠期父源抗原特异性激活调节性T细胞的研究

    屠海燕1，寿张飞2

    (1.浙江大学医学院附属第二医院肾脏内科，浙江杭州321000；2.浙江大学医学院附属第一医院肾脏内科，浙江杭州321000)

    目的探讨妊娠诱导调节性T细胞扩增与父源抗原的关系。方法建立正常妊娠(n=15)、流产倾向(n= 15)、第三方交配(n=15)及假孕(n=6)共四组小鼠模型，观察调节性T细胞水平和激素含量变化。通过抗原特异性验证将父源抗原预免疫小鼠来源的调节性T细胞过继滴注到孕鼠体内，观察其对胚鼠的保护作用。结果流产倾向组与正常妊娠组孕鼠体内黄体酮、雌二醇、雌三醇水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。滴注父源抗原特异性激活调节性T细胞或经父源抗原预免疫的调节性T细胞后，孕鼠流产率下降，调节性T细胞水平升高。结论妊娠期调节性T细胞扩增发挥保护作用的是父源抗原特异性激活，并非单一激素含量变化引起。

    T淋巴细胞，调节性；激素类；抗原；流产，自然

    正常妊娠是一种成功的半同种异体移植现象，孕妇对胚胎半同种异体抗原不产生排斥反应，反而产生保护性免疫应答，这种现象叫母胎免疫耐受，其具体机制一直是该领域研究的热点。最近有研究表明，CD4+CD25+调节性T细胞不但参与了母胎免疫耐受机制的形成，而且对其维持具有重要作用[1]。2005年，Zenclussen等[2]提出，孕期调节性T细胞缺陷将导致免疫性的自然流产，所以调节性T细胞在正常妊娠中发挥了极其重要的作用。此外，已有研究证实，妊娠期间调节性T细胞会大量扩增，调节性T细胞是以抗原特异性方式扩增，并推测妊娠期激素水平变化是导致调节性T细胞扩增的直接因素[2-4]。基于以上问题，为了进一步明确妊娠期调节性T细胞的扩增原因，作者设计了该实验。现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1材料

    1.1.1实验动物雌性CBA/J(H2K)小鼠51只、雄性DBA/2J(H2d)小鼠15只、雄性BALB/C(H2d)小鼠21只、雄性C57/BL6(H2b)小鼠15只均由浙江大学医学院实验动物中心提供。6～8周龄雌性小鼠和8～12周龄雄性鼠交配，每天检查孕栓情况，一旦发现孕栓立即将雌雄鼠分开，发现孕栓当天记录为孕0 d。

    1.1.2试剂荧光素异硫氨酸标记的抗鼠CD4抗体、叶绿素蛋白标记的抗鼠CD3抗体、CY5标记的抗鼠CD8抗体、藻红蛋白标记的抗鼠CD25抗体和抗鼠IgG2a同型抗体均购自德国Becton Dickinson公司 ......