郭 侃，李晓飞，晏 容，刘 云，张 沛，刘 流△(.遵义医学院基础医学院，贵州遵义5600；.贵州省普通高等学校特色药物肿瘤防治特色重点实验室，遵义5600；.贵州省柏强制药有限公司，贵阳550000)

    贵州及周边地区斑蝥资源抗人肝癌HepG2细胞的活性研究*

    郭侃1，李晓飞1，晏容1，刘云2，张沛3，刘流1△

    (1.遵义医学院基础医学院，贵州遵义563003；2.贵州省普通高等学校特色药物肿瘤防治特色重点实验室，遵义563003；3.贵州省柏强制药有限公司，贵阳550000)

    目的初步分析贵州及周边不同地域种斑蝥体内结合斑蝥素的含量，筛选出抗人肝癌HepG2细胞效果显著的地域种。方法采用水提结合斑蝥素方式提取有效成分，运用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析提取液内的结合斑蝥素含量，采用磺酰罗丹明染色法(SRB法)考察提取液对人肝癌HepG2细胞的体外抗肿瘤活性，应用倒置相差显微镜检测凋亡细胞的形态学变化。结果贵州省罗甸县境内南方大斑蝥与黄黑小斑蝥体内所含结合斑蝥素含量均高于其他地区同种斑蝥，分别为375、290 mg/L；不同地域种的斑蝥体内结合斑蝥素对人肝癌HepG2细胞的增殖均有抑制作用，其中贵州茂丼镇境内的2种斑蝥对人肝癌HepG2细胞的抑制效果明显优于其他地区同种斑蝥，其半数抑制浓度(IC50)分别为0.78、0.65 mg/L；形态学观察结果显示，茂丼镇南方大斑蝥体内结合斑蝥素可促进人肝癌HepG2细胞凋亡，且凋亡细胞呈现典型的形态特征。结论不同地域不同种斑蝥体内结合斑蝥素的含量存在较大差异；茂丼镇境内2种斑蝥体内结合斑蝥素对人肝癌HepG2细胞的抑制效果优于其他地域种，可进行深入研究。

    斑蝥；斑蝥素；肝肿瘤；肿瘤细胞，培养的；气相色谱-质谱法；贵州

    一直以来，斑蝥素被认为是斑蝥体内的抗癌活性物质[1]，但本课题组的前期研究发现斑蝥素在斑蝥体内有2种存在形式——游离斑蝥素和结合斑蝥素[2]。进一步研究发现，这些结合斑蝥素多数为斑蝥素盐类衍生物，并且这些斑蝥素盐类衍生物的种类及含量在不同地域的不同种斑蝥之间存在着很大的差异[3]，因此抗肿瘤效果也有巨大差异[4-9]。斑蝥在我国分布较广，主产于贵州、广西、陕西、云南、四川等省，但目前对其药用资源的系统研究较少。本研究通过对贵州及周边地区的斑蝥资源进行系统深入的采集、鉴定和归类，测定斑蝥中结合斑蝥素的含量；以斑蝥素酸钠为阳性对照，测定不同地域不同种斑蝥体内结合斑蝥素对人肝癌HepG2细胞的抑制活性，筛选出抗肿瘤活性较好的优良地域种 ......