瞿 奇，何小亮，张云龙，王 坤，张秀萍(1.广州市第六中学，广东510300；.南方医科大学基础医学院免疫学教研室，广东广州510515；3.南方医科大学基础医学院实验教学管理中心，广东广州510515)

    ·论著·

    雷帕霉素对帕金森病小鼠神经保护效应的研究*

    瞿奇1#，何小亮2#，张云龙2，王坤1△，张秀萍3△

    (1.广州市第六中学，广东510300；2.南方医科大学基础医学院免疫学教研室，广东广州510515；3.南方医科大学基础医学院实验教学管理中心，广东广州510515)

    目的研究雷帕霉素对帕金森病(PD)小鼠模型的神经保护效应。方法采用悬挂试验和爬杆试验检测雷帕霉素对PD小鼠运动行为障碍的改善作用，免疫组织化学检测雷帕霉素对PD小鼠黑质酪氨酸羟化酶、α-突触核蛋白表达水平的影响。结果雷帕霉素明显改善了PD小鼠运动行为缺陷，提高了酪氨酸羟化酶的表达，降低了α-突触核蛋白的表达。结论雷帕霉素对PD小鼠具有明显的神经保护效应。

    帕金森病；多巴胺；神经元；突触蛋白类；西罗莫司

    帕金森病(Parkinson′s disease，PD)是一种中老年常见神经系统变性疾病，临床症状主要以静止性震颤、运动迟缓、肌张力增高和姿势平衡障碍为主，目前，PD病因仍不甚明确。寻找针对PD新的治疗靶点和有效药物对改善PD患者生活质量具有重要意义。雷帕霉素(西罗莫司)是从链球菌中提取的大环内酯类药物，具有免疫抑制作用。有研究表明，雷帕霉素可促进阿尔兹海默病模型中淀粉样蛋白的清除，显示了该药具有明显的神经保护效应[1-5]。雷帕霉素是否可改善PD小鼠运动行为障碍及提高酪氨酸羟化酶的表达，从而对黑质多巴胺神经元发挥神经保护效应是本研究的关键所在。

    1 材料与方法

    1.1材料

    1.1.1实验动物24只雄性C57BL小鼠购自广东省医学实验动物中心。

    1.1.2主要试剂1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1，2，3，6-tetrahydropyridine，MPTP)购自美国Sigma-Aldrich公司，抗酪氨酸抗体购自美国Millipore公司，α-突触核蛋白购自美国Santa Cruz生物技术有限公司，辣根过氧化物酶标记的羊抗小鼠和羊抗兔二抗购自武汉博士德生物工程有限公司。

    1.1.3主要仪器冰冻切片机(德国Leica公司)、倒置显微镜(重庆奥特光学仪器有限公司)等。

    1.2方法

    1.2.1PD模型制备及雷帕霉素治疗参照文献[6-7]的方法腹腔注射MPTP制备PD小鼠模型 ......