马少丹，曾跃彬，薛艺抒，袁秋儿，严艳花，邝慧娴，陈婷婷，陈艺瑛，杜宝玲△(.广州医科大学，广东广州508；.广州市增城区人民医院，广东508)

    肿瘤靶向细胞穿膜肽的设计合成及活性检测*

    马少丹1，曾跃彬2，薛艺抒1，袁秋儿1，严艳花1，邝慧娴1，陈婷婷1，陈艺瑛1，杜宝玲1△

    (1.广州医科大学，广东广州510182；2.广州市增城区人民医院，广东510182)

    目的合成一种可活化细胞穿膜肽(ACPPs)并初步探索其穿膜活性及亚细胞分布。方法应用化学合成方法合成ACPPs，采用流式细胞仪检测ACPPs穿膜活性，免疫荧光法及全波长酶标仪检测表达ACPPs的肿瘤靶向性穿膜作用，用荧光显微镜观察ACPPs在细胞内的定位及ACPPs-pc-Ad.egfp复合物的亚细胞分布。结果成功合成了ACPPs，ACPPs-异硫氰酸荧光素(FITC)组较牛血清清蛋白-FITC组荧光量大，差异有统计学意义(F=4 656.600，P=0.000)，ACPPs具有肿瘤靶向性穿膜活性，人肺癌细胞A549、人结肠癌细胞SW480、人卵巢癌细胞OVCAR3细胞质内荧光量较人支气管上皮细胞HBE大，差异有统计学意义(F=37 947.676，P=0.000)；ACPPs定位于细胞质并介导ACPPs-pc-Ad.egfp复合物分布于细胞质。结论成功合成了ACPPs，ACPPs具有肿瘤靶向性穿膜活性并分布于细胞质。

    肿瘤/治疗；亚细胞部分；大分子物质；细胞穿膜肽；靶向

    细胞穿膜肽(cell penetrating peptides，CPPs)是目前最强、最快的跨膜转运分子，具有水溶性、低裂解性并通过非吞噬作用进入各种细胞膜等特点[1-5]，给肿瘤的治疗带来新的机遇。在CPPs基础上改造而成的发夹状复合CPPs称为肿瘤靶向性CPPs，又称为可活化CPPs (activatable cellpenetrating peptide，ACPPs)。Jiang等[6]研究发现，ACPPs具有运载“货物”范围广、可操作性强的特点，无须通过表达系统进行表达及纯化，人工合成即可，简便易行，不仅可作为独立的肿瘤靶向分子给药，还可与多种合成分子连接后共同给药。因而已逐渐应用于细胞生物学、基因治疗、药物体内转运等领域[6-9]。本研究设计了新的ACPPs，通过检测其肿瘤靶向性及亚细胞分布以获得能分布于细胞质的靶向性跨膜转运分子，以期克服大分子药物治疗固有的细胞摄取障碍，旨在为提高大分子药物治疗的有效性提供有价值的实验依据。

    1 材料与方法 ......