谢 伟，秦雯，蒋凌云，莫馥华，朱时敏，顾克英，罗远富，覃爱平△(.广西医科大学第一附属医院医学生殖中心，广西南宁500；.广西医科大学第一附属医院病理科，广西南宁500；.广西医科大学，广西南宁500)

    ·论著·

    优化胰蛋白酶消化强度进行人子宫内膜上皮细胞培养技术探讨*

    谢伟1，秦雯2，蒋凌云1，莫馥华1，朱时敏3，顾克英3，罗远富3，覃爱平1△(1.广西医科大学第一附属医院医学生殖中心，广西南宁530021；2.广西医科大学第一附属医院病理科，广西南宁530021；3.广西医科大学，广西南宁530021)

    目的探讨优化改良的人子宫内膜原代上皮细胞培养技术。方法将2014年7月1日至2014年9月30日需行诊断性清宫术的患者21例分为0.125%胰蛋白酶组(A组)、0.250%胰蛋白酶组(B组)和1 mg/mL胶原酶组(C组)。同时结合使用100目滤网(150 μm)及400目(38 μm)滤网进行子宫内膜上皮及间质细胞分离，比较各组间子宫内膜上皮细胞纯度和生长状态。结果子宫内膜细胞培养成功19例，A组子宫内膜组织污染1例，C组因细胞量过少接种失败1例。细胞获得后培养进行上皮细胞团百分比计算，A组为(85.71±1.38)%、B组为(75.28±1.50)%和C组为(84.86± 2.34)%，其中A组和C组的上皮细胞百分比高于B组，差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞培养3～5 d后待细胞基本铺满培养孔，免疫组化辣根过氧化物酶底物显色(ABC法)进行纯度检测，A组为(90.28±2.13)%、B组为(84.57±2.76)%和C组为(86.14±4.06)%，A组细胞纯度均大于B、C组，差异均有统计学意义(P<0.05)。A组子宫内膜上皮细胞获得数量和纯度均高于其他两组，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论0.125%胰蛋白酶消化子宫内膜组织结合100目滤网(150 μm)及400目(38 μm)滤网过滤，可以稳定地获得质量良好的子宫内膜上皮原代细胞。

    子宫内膜；上皮细胞；细胞培养技术；胰蛋白酶

    10.3969/j.issn.1009-5519.2016.11.002

    A

    1009-5519(2016)11-1606-03

    子宫内膜上皮细胞是胚胎着床最先接触的部位，也是妇女月经周期变化的基础。对子宫内膜组织及细胞的研究是深入了解妇科疾病发病机制的重要手段，但由于临床患者妇科疾病的特点及医学伦理学的限制，子宫内膜组织来源有限，单纯临床研究受到很大限制，所以子宫内膜上皮细胞培养是研究子宫内膜功能和基因调控的重要辅助手段 ......