实用化改良Feulgen染色法的研究
关键词:二倍体,细胞核,1材料与方法,2结果,3讨论
黄荣祥,余岚岚,聂 琨,唐 剑,何文波,马 亮(厦门麦克奥迪医学检验所,福建厦门361006)
实用化改良Feulgen染色法的研究
黄荣祥,余岚岚,聂琨,唐剑,何文波,马亮(厦门麦克奥迪医学检验所,福建厦门361006)
目的探讨一套具有重复性强、染色稳定、耗时短、可大规模推广的改良Feulgen染色法(TEM35),为临床科研的应用提供方法学指导。方法选取该所2014年3~4月收集的符合实验条件的21例液基宫颈标本,每例宫颈标本混匀后制成2张片子,将42张片子分为两组,每组各21张,采用TEM35、经典Feulgen染色法(TEM25)分别对两组涂片染色,采用Motic DNA图像分析系统测量二倍体细胞核的积分光密度(IOD)及其变异系数(CV),并对测量结果进行统计学分析。结果TEM25所得的整体IOD平均值为114.554,而TEM35所得平均值为112.933,IOD一致性较好(Kendall′s τ=0.692,P<0.01)。TEM25所得CV值为8.166,而TEM35所得CV值为7.732,CV一致性略好(Kendall′s τ=0.568,P<0.01)。结论实用化的TEM35所获结果与TEM25所获结果高度一致,且TEM35耗时短、染色特异性好。
染色与标记;病理学;图像处理,计算机辅助;DNA;肿瘤
近年来,随着恶性肿瘤发病率和死亡率的不断提高,恶性肿瘤已经成为疾病致死的首要原因。基于全球肿瘤流行病统计数据(GLOBOCAN)估计,2012年全球癌症新发病例1 410万,死亡病例820万[1]。国家癌症中心分析数据估计,2015年中国癌症总发病例数为429.16万,总死亡病例281.42万[2],大约每分钟有6人被诊断为癌症[3],中国因癌症死亡的病例总数占全球的近1/4[4]。癌症将对中国乃至全球的公共卫生服务造成越来越大的负担,因此肿瘤的早期诊断显得尤为重要。恶性肿瘤的诊断和预后评价所公认的方法为细胞病理学,然而该方法受限于病理医生的诊疗水平,具有随意及主观性强的缺点。细胞DNA图像分析则是一种客观、可控、独立的病理诊断新技术,能更早地定量反映肿瘤细胞生长情况。大量研究表明,单独采用细胞DNA图像分析或联合细胞学、分子诊断学、免疫学等方法对恶性肿瘤的早期诊断、治疗、预后均具有重要的指导意义[5-9]。自从1924年Feulgen等建立了DNA-Feulgen染色方法以来,Feulgen染色法即成为了DNA图像定量分析的“金标准”[10]。然而,现有的经典Feulgen染色法(TEM25)操作时间较长 ......
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