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编号:362355
大承气汤对急性重症胰腺炎大鼠血清IL-6 sIL-2R诱导胰腺腺泡细胞凋亡的研究*
http://www.100md.com 2018年2月28日 现代医药卫生 2018年第3期
造模,1材料与方法,2结果,3讨论
     张明敏,杜建文(.贵阳中医学院,贵州贵阳55000;.贵阳中医学院第二附属医院急诊科,贵州贵阳 55000)

    急性重症胰腺炎(SAP)起病迅速,发展快,并发症严重,预后不良,病死率高,近年来,相关文献报道其发病率为10%~30%[1-2]。一直以来,SAP均是急腹症领域研究的热点,对于SAP的发病原因也在不断探索中。本实验以中医基础理论为指导,对临床治疗SAP的经典方剂——大承气汤进行研究。大承气汤来自仲景的《伤寒论》,其组方(大黄、厚朴、枳实、芒硝)简单而精妙。本实验采用腹腔注射L-精氨酸方法造模,对造模成功的SD大鼠进行口腔灌胃大承气汤,股动脉采血并开腹取胰腺组织进行相关血清学及胰腺腺泡细胞凋亡分析,观察大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平变化对胰腺腺泡细胞凋亡的影响,探讨大承气汤治疗SAP的可能作用机制,特别是对胰腺腺泡细胞凋亡的作用,为临床用药提供科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 一般材料 采用成年SD大鼠66只,均为雌性,大鼠平均体重为(230±20)g,由四川大学华西医学中心实验动物中心供给。许可证号:scxk(川)2016-09。按照随机数字表法、完全随机分组法将66只大鼠分为空白组、模型组、大承气汤组,其中空白组6只,模型组和大承气汤组各30只。模型组及大承气汤组分别再按时间点 2、6、12、24、48 h 进行分组,每组 6 只。在造模成功后分别将模型组和大承气汤组大鼠按照对应时间点处死并进行分批股动脉取血及手术取胰腺组织。空白组大鼠于腹腔注射生理盐水后3 h采样,模型组造模成功后不再灌胃大承气汤。

    1.1.2 试剂及仪器 主要试剂:L-精氨酸(索莱宝公司);生理盐水(科伦药业股份有限公司);大承气汤(北京同仁堂)。中药煎药机(恒延鑫密闭压榨煎药机)由贵阳中医学院第二附属医院提供;12号灌胃针头;主要酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒:IL-6、sIL-2R由伊来瑞特生物科技有限公司提供,产品编号:E-EL-R0015c。凋亡试剂盒(美国BD公司,货号:551302,规格:MITOSCREEN JC-1 KIT 100TST)由成都百态生物科技有限公司提供。流式细胞仪由贵阳中医学院第一附属医院实验室研究平台提供(药物临床试验机构)。

    1.2 方法

    1.2.1 动物模型建立 动物适应性喂养不禁食、禁饮5 d后,进行实验造模,空白组6只大鼠不做处理,造模前24 h禁食、禁饮。模型组及大承气汤组分别进行SAP造模 ......

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