杨 琴，王 杰，吕沐瀚，唐世孝△(.西南医科大学附属医院消化内科，四川泸州646000；.内江市第一人民医院肝胆胰外科，四川64000)

    胰腺癌是消化道最具恶性的肿瘤之一。据统计，在肿瘤相关致死性疾病中，胰腺癌已位居第4位[1]。近年来，胰腺癌的治疗方式不断得到发展，但是胰腺癌患者仍然保持极低的生存率，其5年生存率仅为8%[1-2]。目前，治疗胰腺癌的主要手段是行手术治疗，然而患者被诊断为胰腺癌时往往错过了最佳手术时机，预后极差[3]。导致这一不良结局的主要原因之一是胰腺的解剖位置较深。一方面，常规检查早期难以诊断；另一方面，早期临床症状不显著、肿瘤早期易转移、对化疗药物不敏感，也是导致胰腺癌早期不易被诊治的原因[4]。因此，寻找一个特异性强、敏感性高的生物靶点显得尤为重要。

    近年来有研究表明，miRNA作为独立生物靶点在各种肿瘤中已被证实与肿瘤的发生、发展密切相关[5]。miRNA是一类非编码的微小RNA，可以在转录后或翻译水平与靶mRNA结合，使其降解并抑制基因的表达，从而参与调控细胞一系列生物行为[6]。有研究报道，miR-345在小细胞肺癌、前列腺癌及肝癌细胞中低表达，过表达miR-345能抑制上述肿瘤生物学性状的改变，抑制肿瘤生长[7-9]。然而，针对胰腺癌的研究中，miR-345的相关报道还较少。本文重点探讨miR-345在胰腺癌细胞中对肿瘤生物学特性增殖的影响。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞株和制剂 本实验所选人胰腺癌细胞株分别为 AsPC-1、BxPC-3、PANC-1、MIA PaCa-2、SW1990 及人正常胰腺导管上皮细胞株HPDE，均购自美国ATCC细胞库，细胞培养基1640、DMEM、胎牛血清均购自美国Gibco公司，miR-345及U6引物由广州锐博生物科技有限公司负责设计及包装，慢病毒载体(lv-miR-345-U)购自上海吉凯公司，细胞计数Kit-8(CCK-8)试剂盒购自日本同仁化学研究所，Bcl-2抗体购自美国Abcam公司。

    1.1.2 动物 所选择的免疫缺陷小鼠均为雌性，年龄4周龄，体重14～15 g，均购自北京华阜康公司。

    1.1.3 组织标本 10对人胰腺癌组织及对应癌旁组织标本由西南医科大学附属医院2016年1—12月术后收集，并由病理确诊为胰腺癌，置于-80℃冰箱保存。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养 将10%胎牛血清的高糖DMEM培养基用于培养细胞株PANC-1和MIA PaCa-2 ...... 濡傛灉鎮ㄥ湪浣跨敤鎵嬫満绛夋祦瑙堟椂鏃犳硶鏌ョ湅鎴栦笅杞藉叏鏂囷紝鍙兘鏄鎼滅储寮曟搸澶辩湡鈥滆浆鐮佲€濓紝璇风偣鍑诲睆骞曟渶涓嬫柟鐨勨€滅數鑴戠増鈥濇垨鈥滃師缃戦〉鈥濊闂€�


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