张成晨，刘莉娟，李楠，郭秀丽，章梦琦，肖娟，翟立红△，龚文容(.湖北文理学院，湖北襄阳44053；.襄阳市中心医院肿瘤科，湖北440)

    结肠癌是人类常见的恶性肿瘤之一，全球各个地区的发病率存在明显差异，但发病率和病死率排名均靠前。其在西欧、北美等发达国家中的发病率高于亚洲、非洲。近些年，我国结肠癌发病率已超过发达国家，这与人们的高脂肪饮食习惯有关[1]。结肠癌在发生和演变过程中受不同基因诱导调控，ARGONAUTE蛋白和DICER酶是RNA诱导沉默复合体(RISC)的主要组分，在RNA干扰中发挥重要作用。人类ARGONAUTE家族分成AGO亚家族和PIWIL亚家族，共有八大成员，分别为 AGO1、AGO2、AGO3、AGO4、PIWIL1、PIWIL2、PIWIL3、PIWIL4基因。人类DICER家族有2位成员分别为DICER和DROSHA蛋白。近年来，相关研究表明，ARGONAUTE家族和DICER家族在人类肿瘤发生、发展过程中均有密切联系，可作为诊断肿瘤的新指标。本研究通过实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测分析AGO和DICER基因家族在正常结肠组织和癌组织中的表达情况，探讨其与结肠癌的关系，初步探索ARGONAUTE和DICER基因家族在结肠癌发生、发展中的作用及其在临床中的意义。现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料 本研究选取襄阳市中心医院肿瘤科术中结肠癌切除后即取配对的癌组织和癌旁组织，并经医院伦理委员会批准。

    1.2 仪器与试剂 RNA提取试剂盒(艾德莱)，逆转录试剂盒(TOYOBO)，SYBR green qPCR mix(艾德莱)，荧光定量PCR仪(ABI)。

    1.3 方法

    1.3.1 结肠癌组织和癌旁组织的cDNA获取 将取得的结肠癌组织和癌旁组织标本置于冻存管中，立即投入液氮中速冻，在液氮中保存。提取RNA时取约0.2 g冻存组织，按RNA提取试剂盒说明书提取组织总RNA，依据逆转录试剂盒说明书，将提取的RNA逆转录成 cDNA。RNA 热变性：12 μL 体系 ......