王帅，李成库，周延民(.遵义医学院附属口腔医院科研科，贵州遵义563000；.吉林大学口腔医学院，吉林长春300)

    大体积骨缺损仍是医学尚未解决的重大难题之一。自体骨移植仍被认为是修复骨缺损的“金标准”，然而其应用受到许多限制，如需开辟第二术区、手术时间长、引起供区损伤、可取骨量有限、植入后骨吸收等。近年来，异质移植材料及人工合成材料的研究应用取得了很大进展。已有许多生物活性蛋白与各类支架材料复合以提高人工骨替代材料成骨能力的文献报道[1-2]；但蛋白与支架材料的吸附与缓释，以及重组蛋白的成本及活性问题等限制了其临床应用。而黏附肽类保留了相关蛋白中发挥生理作用的主要成分，参与了细胞生物力信号的传导，可促进细胞黏附、增殖、分化等，且空间构象相对固定，合成简单，P-15多肽就是其中的代表。

    骨的有机成分中90%以上是由Ⅰ型胶原构成的，在其α1链上一段与间充质细胞结合且高度保守的15个氨基酸序列被称为P-15[3]。其能与各种前体细胞上的整合素受体结合，促进细胞黏附，释放生成因子，协同促进成骨细胞前体细胞的分化。携带P-15多肽的无机牛骨(PepGen P-15TM)在口腔上颌窦提升术[4]、牙周组织再生[5]，以及同富血小板纤维蛋白合用于骨再生[6]多有文献报道，显示了这种骨替代材料一定的优越性。

    生物玻璃是通过美国食品药品监督管理局认证的人工骨材料，其与体液接触后经一系列化学反应，在材料表面形成富含硅的凝胶层，在此表面磷酸钙聚集晶化形成碳酸羟基磷灰石，胶原和一些黏多糖也被吸附，新生的骨质层可与生物玻璃紧密结合在一起[7]。因此，本研究联合生物玻璃与P-15多肽各自的优点用于骨缺损动物模型的修复，为以仿生多肽为基础的生物材料的研究提供理论和实验基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 试剂 P-15序列为GTPGPQGIAGQRGVV，由生工生物工程(上海)股份有限公司合成；高效液相色谱法分析其纯度为96.28%，质谱图报告结果相对分子质量为1 393.58 D。生物玻璃购自北京国药前景公司，速眠新麻醉剂Ⅱ、陆醒宁通用名等由解放军军需大学提供，杜氏改良Eagle培养基购自美国Gibco公司，胎牛血清购自奥地利PAA公司，碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

    1.1.2 仪器 二氧化碳恒温细胞培养箱(日本三洋公司)、超净工作台(上海博讯医疗生物仪器股份有限公司)、倒置显微镜(OLYMPUS CKX41型)、GIOTTO钼靶软X线机(意大利IMS公司)、石蜡切片机(德国Letiz公司)、紫外分光光度仪U-2910(日本日立公司)等 ......