曹 芳，王宇峰，于春梅，夏西洋，戴秀亮，杨海燕(南京医科大学附属常州市妇幼保健院生殖中心，江苏213000)

    胚胎质量是影响临床治疗结局的重要因素之一，将卵裂期胚胎继续培养至囊胚阶段，有利于进一步筛选出发育潜能好的胚胎，相较于卵裂胚，囊胚移植具有更高的种植率[1]。然而，体外环境不完全等同于体内环境，扩大培养后，可能使本来在体内可发育成囊胚的卵裂期胚胎停滞，降低囊胚形成率[2]。影响卵裂期胚胎继续囊胚培养结局的因素是多方面的。不同中心之间因临床促排卵方案、实验室培养环境及胚胎和囊胚评分系统差异等原因，囊胚形成率有所不同[3]。本研究回顾性分析了不同质量第3天(D3)胚胎继续培养后总囊胚形成率和优质囊胚形成率，并进一步分析了影响总囊胚形成比率及发育成囊胚速度的因素，探讨D3非优质胚胎继续培养囊胚的应用价值。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 回顾性分析2017年1—8月在本中心行辅助生殖技术助孕的180对夫妇患者资料，共收集1009枚D3卵裂期冷冻后剩余胚胎，分为优质胚胎组(Ⅰ、Ⅱ级，664枚)及非优质胚胎组(Ⅲ级，345枚)。患者不孕原因包括输卵管盆腔因素、子宫内膜异位症等女方因素、双方免疫因素、男方因素及不明原因不孕。

    1.2 方法

    1.2.1 囊胚培养 在序贯培养基(瑞典vitrolife公司)中培养至囊胚期，将D3胚胎从G1培养液移入平衡过夜的G2培养液中，于37℃、6%CO2环境中继续培养至第6天(D6)。

    1.2.2 胚胎评分 受精后D3观察胚胎，按Peter卵裂期胚胎评分系统评估D3胚胎质量。Ⅰ级：卵裂球均匀，透亮，碎片率小于10%。Ⅱ级：卵裂球稍不均匀，碎片率为10%～20%。Ⅲ级：卵裂球形状明显不规则，细胞质中有颗粒现象，碎片率为20%～50%。Ⅰ级和Ⅱ级均为优质胚胎，Ⅲ级为非优质可用胚胎。

    1.2.3 囊胚评分 按照Gamder囊胚评分法，根据囊胚扩张和孵化的程度将囊胚分成3～6级：3级为囊胚腔占据整个囊胚；4级为囊胚腔体积较早期囊胚明显扩大 ......