护心康对TLR4?/?小鼠动脉粥样硬化模型FZD的影响*
閸忔娊鏁拠宥忕窗脂蛋白,阿托,1材料与方法,2结果,3讨论
董晓斐,丁小玉,贺佳幸,屈 波(.湖南中医药大学第一附属医院儿科,湖南长沙 4007;2.湖南中医药大学医学院组织胚胎学教研室,湖南长沙 40208)
动脉粥样硬化发病机制尚未阐明,目前公认其与血脂代谢紊乱有关,与高脂血症的关系尤为密切[1]。Wnt信号通路与动脉粥样硬化和冠心病的发病密切相关,可能成为控制动脉粥样硬化的新靶点[2]。激活Toll样受体4(TLR4)可介导动脉粥样硬化血管壁炎症,抑制TLR4是否影响Wnt信号的表达,尚未见报道。既往研究表明,护心康对动脉粥样硬化具有较好的防治效果。本研究通过TLR4基因敲除小鼠(TLR4-/-小鼠)动脉粥样硬化模型,观察Wnt信号通路中卷曲蛋白(FZD)的变化及护心康的干预作用,探讨护心康防治动脉粥样硬化的作用机制,为动脉粥样硬化的治疗提供新的理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 SPF级TLR4-/-小鼠70只,6周龄,体重(20.3±2.5)g,雌雄各半,购自南京大学模式动物研究所,合格证号:201800971。普通饲料由湖南中医药大学动物实验中心提供,高脂饲料由上海普路腾生物科技有限公司生产提供。动物饲养于湖南中医药大学实验动物中心SPF级动物实验室。所有研究人员均人道地进行动物实验,严格遵守动物实验伦理条例。
1.2 仪器与试剂 罗氏公司Cobas8000全自动生化分析仪及配套胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、三酰甘油检测试剂盒。美国GBI公司兔抗小鼠FZD单克隆抗体、PV-6002羊抗小鼠IgG/辣根过氧化物酶(HRP)聚合物。美国R&D公司Wnt抑制因子(WIF)。日本Olympus公司BX-51型光学显微镜及数码摄影系统。辉瑞公司阿托伐他汀钙片(每片20mg,国药准字H20051408)。护心康片由湖南省中医研究院附属医院制剂室生产[(湘)卫药剂(2003)12第 039号],由瓜蒌皮、薤白、陈皮、远志、法半夏、茯苓、荜澄茄、石菖蒲、旋覆花、隔山消、苦杏仁、茜草、三七、丹参、蒲黄、五灵脂、琥珀、北山楂、葳蕤、黄芪、炙甘草等组成 ......
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