蒋荩芳，杨宇勤，王 恒，朱娇三，王明珊，成 鑫

    (遵义医科大学附属航天医院检验科，贵州 遵义 563000)

    作为社区获得性感染及医院感染的重要病原菌之一，金黄色葡萄球菌，特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)可引起肺炎、支气管炎、皮肤软组织感染、脓毒症、脑脓肿等疾病[1-2]。流行病学研究表明，MRSA感染主要以克隆群播散为主，不同地区流行的金黄色葡萄球菌克隆群不尽相同。如克隆群8(CC8)主要流行于美洲，CC22和CC30主要流行于欧洲，而CC239(ST239)主要流行于亚洲。在我国，携带Ⅲ型SCCmec的CC239占临床MRSA分离株的50%以上，包括2个主要的亚群，ST239-MRSA-Ⅲ-t037和ST239-MRSA-Ⅲ-t030[3]。

    金黄色葡萄球菌可产生如脂蛋白(Lpp)、溶血素、血浆凝固酶等致病因子[4]。在金黄色葡萄球菌的基因组中，Lpp的编码基因有55～70种，主要参与生物信号传递、物质转运和细胞膜的稳定等[5]。金黄色葡萄球菌中约30% Lpp的作用目前尚还不清楚，研究发现，这些功能不明的Lpp序列，与已知的Lpp存在一定差异，它们缺乏典型的脂盒结构，故又被称之为脂蛋白样蛋白(Lpl)[5]。金黄色葡萄球菌产生的Lpl可分泌到细胞外，具有激活TLR2依赖的信号途径，诱导宿主产生过度的炎性反应，这可能是金黄色葡萄球菌引起脓毒症的机制之一[6]。

    β-内酰胺类抗菌药物常用于预防感染[7]，低剂量的抗菌药物可产生信号诱导作用，导致细菌胞外释放DNA、生物膜形成、产生毒力因子，从而加重细菌感染[8-9]。除具有抗菌作用外，亚抑菌浓度的β-内酰胺类抗菌药物还诱导金黄色葡萄球菌分泌肠毒素、α-溶血素、葡萄球菌A蛋白、杀白细胞毒素等，促进细菌的致病性[8,10]。由此可见，经验性使用β-内酰胺类抗菌药物，在一定程度上不但不能抑制或杀灭MRSA，而且可能促进该菌的致病作用，加重感染。探讨亚抑菌浓度β-内酰胺类抗菌药物在诱导MRSA毒力基因表达中的作用，对深入了解MRSA致病性增强的原因和指导临床合理使用抗菌药物具有重要意义。

    1 材料与方法

    1.1实验菌株、质粒与试剂 MRSA菌株由陆军军医大学饶贤才教授课题组惠赠[11]。大肠埃希菌DH5α，BL21和表达质粒pET28a(+)从北京天根(Tiangen)生物技术有限公司购买。质粒提取试剂盒购自Promega公司。细菌培养基LB、BHI和TSB均购自Oxoid公司。

    1.2方法

    1.2.1MRSA对不同抗菌药物的敏感性测定 挑取待测的MRSA菌株单菌落 ......