杨 慧，李 欣，刘 静，黄 东，颜 辉

    (1.中南大学湘雅三医院麻醉科，湖南 长沙 410013；2.中南大学湘雅二医院疼痛科，湖南 长沙 410012；3.湖南省儿童医院麻醉科，湖南 长沙 410007；4.中南大学湘雅三医院疼痛科，湖南 长沙 410013；5.中南大学湘雅三医院神经外科，湖南 长沙 410013)

    癌性爆发痛是临床上一类难治性癌痛，发生率高达40%～80%[1-2]，是导致癌痛治疗效果不佳的重要原因[3]。目前国内外关于癌性爆发痛的研究多集中于临床特征和药物应用方面[4]，对动物模型的研究罕见报道，因此建立稳定的癌性爆发痛模型已成为亟须解决的关键问题。本实验在前期成功制备内皮素-1(ET-1)单次诱发型骨转移癌性爆发痛动物模型的基础上(PMID：26828300)，改进吗啡和ET-1注射的次数和天数，制备4组模型小鼠，通过比较行为表现和痛阈变化，选出优化的癌性爆发痛模型，并从疼痛行为学角度对该模型进行评价，以期为进一步研究提供可靠的模型平台。

    1 材料与方法

    1.1实验动物 6～8周龄雄性C57BL/6小鼠54只，体重20～25 g，购买于湖南斯莱克景达实验动物有限公司。每4～5只小鼠放一个鼠笼，饲养于光控(8：00—20：00，12 h照明)和温控[(22.0±0.5)℃]、相对湿度为50%的房间内自由获取水和食物。本研究获得中南大学湘雅三医院动物伦理委员会的批准[No.LLSC(LA) 2016-017]。

    1.2仪器及试剂 离心机(Centrifuge 5804R、5415R型，德国Eppendorf公司)，CO2细胞培养箱(美国Thermo公司)，恒温水浴箱(瑞典Pharmacia公司)，全自动制冰机(美国Labrepco 公司)，玻璃观察箱(50 cm×20 cm×30 cm，自制)，Von Frey纤维丝测痛仪(美国North Coast Medical公司)，计时器(上海市秒表厂)。一次性细胞培养瓶(25 cm2/75 cm2，美国AXYGEN公司)，一次性离心管(15 mL/50 mL，美国AXYGEN公司)，全自动细胞计数器(美国Bio-Rad公司)，微量进样器(10 μL/25 μL，上海市高鸽工贸有限公司)。高糖培养基(美国Gibco公司) ......