陈 瑶，裴光德，李 娟，王 芳，冉华丽，李 蓉，肖文科，汤荣睿

    (重庆市沙坪坝区人民医院医学检验科，重庆 400030)

    金黄色葡萄球菌是一种革兰阳性球菌，分布广泛、致病性强、耐药率高，可导致院内感染流行，是医院内感染常见的病原体之一，也是引起人类化脓性感染的常见病原菌[1]。近年来，金黄色葡萄球菌暴发流行，当患者机体免疫功能低下或皮肤黏膜出现破损时，可突破皮肤及黏膜屏障，导致皮肤、肺等部位出现感染，从而引起败血症、脓毒症等，造成极其严重的临床后果[2]。细菌生物膜可将细菌包裹其中保护细菌不受抗菌药物的作用，并能降低机体免疫功能和细胞的吞噬作用，是发生持续性感染及感染难以治愈的主要原因[3]。研究表明，生物膜能阻碍抗生素的释放并参与抗生素耐药[1]。金黄色葡萄球菌极易形成生物膜以逃避机体的免疫系统和抗菌药物的杀灭作用，导致金黄色葡萄球菌致病性和耐药性明显增强。

    金黄色葡萄球菌的传统治疗方法仍以抗生素为主，临床上常使用大环内酯类(MLSB类)即(如红霉素)、林可酰胺类(如克林霉素)、B类链阳霉素类抗菌药物治疗金黄色葡萄球菌引起的感染。克林霉素因其半衰期长、不良反应少被广泛使用。然而，随着广谱抗生素的大量使用，多重耐药菌的发生呈上升趋势[4-5]。金黄色葡萄球菌对克林霉素的耐药率逐年上升，仅次于青霉素和红霉素。然而，我国住院患者分离的金黄色葡萄球菌体外生物膜形成能力及其与耐药性的关系研究甚少。本研究拟通过对本院2019年9月至2020年9月分离的克林霉素耐药型金黄色葡萄球菌耐药基因及生物膜形成能力的研究，以期更深入地了解克林霉素耐药型金黄色葡萄球菌发生的分子机制，为临床上控制耐药菌的产生提供可靠的理论基础。

    1 材料与方法

    1.1材料

    1.1.1菌株来源 收集沙坪坝区人民医院在2019年9月至2020年9月临床分离的金黄色葡萄球菌，根据药敏试验结果和D试验，选取结构型和诱导型克林霉素耐药金黄色葡萄球菌作为研究菌株。同一患者、同一时期相同部位分离的菌株只取1次作为研究。菌株均来自本院住院和门诊患者送检的样本，包括痰液、尿液、脓液、分泌物等。

    1.1.2仪器与试剂 全自动细菌鉴定及药敏试验分析仪(湖南天地人生物科技有限公司)；二氧化碳恒温培养箱(上海三腾仪器有限公司)；基因扩增仪(珠海黑马医学仪器有限公司)；凝胶电泳成像仪(美国BIO RAD公司)；酶标仪(上海科华实验系统有限公司)；DNA抽提试剂盒及PCR试剂盒(上海生工生物工程股份有限公司)；erm耐药基因引物(上海生工生物工程股份有限公司)；Star Marker D2000 Plus(广州市康润生物科技有限公司)；1%结晶紫染色液(上海心语生物科技有限公司) ......