脊髓背角miR-16-5p可能通过靶向Akt3调节带状疱疹后遗神经痛
神经病,1材料与方法,2结果,3讨论
张德新,张桂友(遵义医科大学附属医院疼痛科,贵州 遵义 563000)
带状疱疹后遗神经痛(PHN)是带状疱疹(HZ)最常见的后遗症,HZ愈合后超过1个月仍存在原皮损区疼痛,则为PHN[1]。中国医院内统计显示,HZ的发病率为7.7%,PHN的发病率为2.3%,其中29.8%的HZ患者会发展为PHN[2]。目前尚缺乏良好的PHN治疗药物及方法,其中原因之一为PHN的疼痛机制尚未阐明[3]。
MiRNA是具有调控功能的非编码RNA,主要通过与靶基因结合,抑制后者的功能。因其生物学效应显著、分子量小(22 nt左右)、易于合成和改良,具有很好的临床应用前景。神经病理性疼痛动物模型能诱导背根神经节、脊髓背角、海马及前扣带皮层中的miRNA出现差异性表达,miRNA在NP中的作用机制可能涉及神经炎性反应、突触可塑性、神经元兴奋性和DNA甲基化[4]。MiRNA作为一种微型介质,有可能成为神经病理性疼痛的生物学标志物及可能潜在的治疗靶点,从而为神经病理性疼痛提供更好的诊断和治疗方法[5]。可见miRNA参与了神经病理性疼痛的发生发展。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1实验动物 雄性SPF级C57/BL6J小鼠24只,体重25~30 g,鼠龄6~8周,购于长沙天勤生物技术有限公司,证书编号:SCXK(湘)2014-0011。饲养于贵州省麻醉与器官保护重点实验室动物房。
1.1.2主要试剂 BCA蛋白浓度测定试剂盒(碧云天,上海);CIP buffer(Exiqon,丹麦);CIP酶(Exiqon,丹麦);DEPC水(Solarbio,北京);HRP标记羊抗兔二抗(博士德,武汉);HRP标记羊抗小鼠二抗(博士德,武汉);Mir-X miRNA First-Strand Synthesis Kit(Clontech,美国);PrimeScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser(Takara,日本);RNAiso Plus(Takara,日本);树脂毒素(RTX,Acros,美国);RIPA裂解液(碧云天,上海);TB Green Premix Ex Taq Ⅱ(Tli RNaseH Plus,Takara,日本);TEMED(国药集团,上海);兔多抗Akt3一抗(ab152157,Abcam ......
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