靳馥宇，王晓菁，李雅倩，李 田，杨欣雨，徐 洪△

    (1.华北理工大学公共卫生学院，河北 唐山 063000；2.华北理工大学基础医学院，河北 唐山 063000)

    矽肺病是我国最严重的职业病之一，是长期吸入游离二氧化硅所致的肺部疾病。目前，有研究认为，巨噬细胞吞噬二氧化硅引起肺部炎性反应，最终导致肺纤维化和结节性病变的形成[1]。有研究显示，在尘肺病患者和矽肺马中均发现了骨密度下降和骨质疏松症[2-4]。因此，推测矽肺病和骨质疏松症可能具有共同的信号传导通路，核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)信号是破骨细胞分化的关键信号通路[5]，RANKL通过信号受体RANK传递信号。通过激活破骨细胞生成的活化T细胞核因子1(NFATc1)诱导破骨细胞生成，表达破骨细胞基因[6]。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)是破骨细胞分化的重要标记物之一，且其在慢性阻塞性肺疾病和哮喘患者的肺组织中均检测出TRAP的阳性表达[7-8]，证实肺部疾病与破骨细胞活化可能具有相同的信号传导通路。N-乙酰基-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)是一种体内肾素-血管紧张素系统调节肽，本课题组前期研究证明其具有抑制矽肺大鼠肺纤维化的作用。因此，本研究拟通过体内研究观察RANKL信号在矽肺小鼠模型中是否被激活，且Ac-SDKP能否通过调节RANKL信号发挥拮抗矽肺小鼠的作用及其效果。

    1 材料与方法

    1.1材料 二氧化硅(SiO2)粉尘购于美国Sigma公司；Ac-SDKP购于瑞士Bachem AG公司；破骨细胞染色试剂盒购于杭州联科生物技术有限公司；弹力蛋白染色试剂盒购于中国珠海贝索生物技术有限公司；荧光二抗购于美国Novex公司；DAPI购于美国Cell Signaling Technology公司；CD68购于美国Abcam公司；基质金属蛋白酶-12(MMP-12)购于中国浙江华安生物科技有限公司；RANKL购于中国台湾Arigo公司；OC-STAMP购于美国FabGennix公司；AP-1购于中国台湾Arigo生物公司；NFATc1购于美国Affinity公司；NF-κB购于中国台湾Arigo 生物公司；免疫印迹二抗购于美国KPL公司；ECL发光试剂购于中国北京庄盟生物科技有限公司 ......