朱思明,李 标

    (海南医学院第二附属医院胸外科一区,海南 海口 570311)

    肺癌作为一种发病率及病死率都比较高的恶性肿瘤,起源于肺部的支气管黏膜或腺体。肺癌在男女患者所患恶性肿瘤中,发病率占11.4%,肺癌一直是导致癌症患者死亡的首要原因,占所有癌症死亡的18%[1]。肺癌的发病率与吸烟、职业暴露(石、硅、镍、煤烟等)、慢性阻塞性肺疾病、遗传等因素有较明显的关系[2]。由于肺癌早期缺乏较特异性的临床表现,因此临床确诊时,患者大多已经处于肺癌的中期或晚期[3]。虽然近些年随着医学水平的进步,肺癌的治疗得到了有效的改进,但是当下患者的5年生存率还需进一步提升[4]。因此,科研工作者们对肺癌发生发展的分子机制进行进一步的探索研究,力图寻找新的、有潜力的、有效果的分子治疗靶点。

    Anillin肌动蛋白结合蛋白(ANLN)最先是从果蝇的胚胎组织中提取到的一种蛋白质,研究者们发现其能够与F-肌动蛋白特异性地结合,因此将其命名为F-肌动蛋白结合蛋白[5]。在人类基因组中,ANLN基因(NM_018685)位于7p14.2,其含有24个外显子,编码相对分子质量为123×103的1 125个氨基酸残基[6-8]。在众多的肌动蛋白结合蛋白中,ANLN 作为细胞骨架中重要的组成成分,参与细胞的多种病理生理过程[9]。ANLN表达异常在多种癌症中起到重要的作用,但是在肺癌中的作用研究较少,因此本研究采用在A549细胞中敲除ANLN基因,探讨ANLN基因在肺腺癌细胞中增殖、迁移过程中的作用及部分机制,从而为寻找肺腺癌的治疗靶点提供新思路。

    1 材料与方法

    1.1材料 A549肺癌细胞(上海市干细胞技术有限公司)。经由靶向ANLN-siRNA基因敲除技术得到的实验组(ANLN-A549组)及对照组(Ctrl-A549组)细胞均由广州源井生物科技有限公司制备。磷酸盐缓冲液(PBS)、胰蛋白酶-乙二胺四乙酸(EDTA,0.25%),含酚红、DMEM高糖培养基、FBS胎牛血清均购于美国Gibco公司。CCK-8试剂盒购于Biosharp生物科技有限公司。Transwell 试剂盒购于美国Corning 公司 ......