陈丹丹,李 丽,于 宁,刘晓庆

    (山东中医药高等专科学校:1.医学系;2.科研处,山东 烟台 264100)

    帕金森病(PD)是由遗传和环境等因素共同作用导致的一类神经退行性疾病,患者出现运动症状和一系列非运动症状[1],导致生活质量下降及严重的家庭经济负担。我国PD发病率呈上升趋势,成为目前增长速度最快的神经系统疾病[2]。PD病变部位主要为中脑黑质、边缘系统、大脑皮质等,但有研究表明,PD病变部位除上述部位外,尚累及脊髓神经元[3]。

    天智颗粒由《中医内科杂病证治新义》中的验方“天麻钩藤饮”化裁而成,具有活血化瘀、平肝熄风、补益肝肾等功效。已有临床和实验研究证实,天智颗粒对脑血管疾病具有一定的疗效,可有效改善患者行为和日常生活能力[3-4]。但针对天智颗粒保护PD患者多巴胺(DA)能神经元的效用和机制进行的研究很少见,对中脑黑质-纹状体通路以外的中枢神经部位DA能神经元损伤进行的研究则更少见。故本研究通过1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)腹腔注射的方法构建PD小鼠模型,研究了天智颗粒对其中脑黑质和脊髓部位DA能神经元的影响,现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1材料

    1.1.1实验动物 2022年9月选取C57BL/6J小鼠50只,无特定病原体级,体重18～22 g,8～12周龄,雌雄不拘。购自山东济南朋悦实验动物繁育有限公司,合格证号[SCXK(鲁)20190003]。本研究已通过山东中医药高等专科学校实验动物伦理审查委员会审批。实验于20～25 ℃清洁级实验室进行,单笼饲养,自然光照,自由饮水进食,适应性喂养1周。

    1.1.2主要试剂及仪器 天智颗粒(Lot:091201,河南宛西制药公司)、MPTP(Lot:143208,百灵威科技有限公司)、兔抗小鼠酪氨酸羟化酶(TH,Lot:bs-0016R,北京博奥森生物技术有限公司)、链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物免疫组化染色试剂盒(Lot:SA1052,武汉博士德生物工程有限公司)、3,3′-二氨基联苯胺四盐酸盐显色试剂盒(Lot:ZLI-9018,北京中杉金桥生物工程公司)、苏木素染色剂(Lot:G1080,北京索莱宝科技有限公司)、奥林巴斯DP-72显微镜、自制小鼠泳箱等 ......